Anti-Phospho-Camk2-T286 Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB - Q13554 / Q13557 / Q13555 / Q9UQM7

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Camk2 (CaMKII)

• CaMKII ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die als Holoenzymkomplex fungiert, wobei die Beta-Untereinheit (CAMK2B) eine Schlüsselrolle bei der neuronalen Entwicklung und Plastizität spielt (PubMed:16690701, PubMed:29100089). Zugehörige Referenzen: PMID:16690701, PMID:29100089
• In Neuronen weist CaMKII beta eine kinaseunabhängige strukturelle Funktion auf: Es bindet und bündelt Aktinfilamente, was für die Morphogenese dendritischer Stacheln und die synaptische Plastizität essenziell ist (PubMed:29100089). Zugehörige Referenzen: PMID:29100089
• Die Autophosphorylierung von CaMKII (unter anderem an Thr286 in vielen Isoformen) nach Bindung von Ca2+/Calmodulin erzeugt eine Ca2+-unabhängige autonome Kinaseaktivität, die kritisch für die Langzeitpotenzierung (LTP) und das hippocampusabhängige Lernen ist (PubMed:16690701, PubMed:29100089). Zugehörige Referenzen: PMID:16690701, PMID:29100089
• Im Skelettmuskel reguliert CaMKII beta den Ca2+-Transport im sarkoplasmatischen Retikulum durch Phosphorylierung von Triadin und Phospholamban und moduliert so die Muskelfunktion als Reaktion auf Bewegung (PubMed:16690701). Zugehörige Referenzen: PMID:16690701
• Bei ER-Stress phosphoryliert CaMKII beta den Retikulophagie-Regulator RETREG1 an Ser-151, was seine Oligomerisierung und Membranspaltungsaktivität für die Retikulophagie fördert (PubMed:31930741). Zugehörige Referenzen: PMID:31930741
• Das Protein lokalisiert in mehreren zellulären Kompartimenten, darunter Zytoplasma, Zytoskelett, Zentrosom, sarkoplasmatische Retikulummembran und Synapsen, was seine vielfältigen Funktionen widerspiegelt.
• CaMKII beta ist weit verbreitet exprimiert, mit hohen Gehalten im erwachsenen und fetalen Gehirn sowie im Skelettmuskel – im Einklang mit seinen Funktionen bei der Neurogenese und Muskelphysiologie.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid um T286 von menschlichem Camk2; diese Stelle ist über alle CAMK2A/B/G/D-Isoformen hinweg und bei der Maus konserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt. Es wird empfohlen, den Antikörper in Lysaten von Mäusegehirn oder -muskel zu validieren.
• Beim Western Blot erwarten Sie eine Bande bei etwa 54 kDa, die phosphoryliertem Camk2 entspricht. Fügen Sie geeignete Ladekontrollen und wenn möglich eine phosphatasebehandelte Probe hinzu, um die Phosphorylierungsspezifität zu bestätigen.
• Verwenden Sie im ELISA das Phosphopeptid als Beschichtungsantigen und das entsprechende nicht phosphorylierte Peptid als Negativkontrolle, um die Spezifität zu bestimmen.
• Da der Antikörper eine aktivierungsabhängige Phosphorylierung erkennt, optimieren Sie die Stimulationsbedingungen (z. B. Behandlung mit Ca2+-Ionophor oder Neurotransmittern) für eine zuverlässige Detektion in zellulären Modellen.
• Bestimmen Sie die optimale Arbeitsverdünnung für jede Anwendung experimentell; empfohlene Startverdünnungen liegen für WB typischerweise bei 1:500–1:2000.

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