Anti-Phospho-c-Myc (T358) polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – P01106

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von c-Myc

• Das c-Myc-Protoonkogen-Protein (auch bekannt als MRTL, MYCC, bHLHe39) ist ein Transkriptionsfaktor, der eine zentrale Rolle bei Zellproliferation, Wachstum und Apoptose spielt (PubMed:24940000, PubMed:25956029). Verwandte Referenzen: PMID:24940000, PMID:25956029
• Es bindet sowohl unspezifisch als auch spezifisch an E-Box-Motive (5'-CAC[GA]TG-3') in Promotoren, aktiviert wachstumsbezogene Gene und VEGFA, um die Angiogenese zu fördern (PubMed:24940000, PubMed:25956029).
• Reguliert die somatische Reprogrammierung und erhält die Selbsterneuerung in embryonalen Stammzellen (gemäß Ähnlichkeit).
• Wirkt zusammen mit TAF6L, um angehaltene RNA-Polymerase II freizusetzen und reguliert positiv die Spleißfaktoren HNRNPA1, HNRNPA2 und PTBP1, wodurch die alternative Spleißung von PKM moduliert wird, um die M2-Isoform zu begünstigen (PubMed:20010808). Verwandte Referenzen: PMID:20010808
• Lokalisiert überwiegend im Zellkern (Nukleoplasma und Nukleolus), tritt aber auch im Zytoplasma auf und assoziiert mit Chromosomen.
• Wird posttranslational durch Acetylierung, Ubiquitinierung und Phosphorylierung modifiziert. Die Phosphorylierung an Thr358 (das Epitop dieses Antikörpers) ist eine von vielen regulatorischen Ereignissen, die die Stabilität und Aktivität von c-Myc beeinflussen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Für das Western Blotting beträgt das vorausgesagte Molekulargewicht 51 kDa; aufgrund umfangreicher posttranslationaler Modifikationen können Banden jedoch bei anderen Größen auftreten. Validieren Sie den Antikörper mit geeigneten Positiv- und Negativkontrollen in Ihrem Zellsystem.
• Verwenden Sie im ELISA das phosphospezifische Peptid zur Beschichtung oder Kompetition, um die Spezifität für die T358-phosphorylierte Form zu bestätigen. Nicht phosphoryliertes Peptid kann als Negativkontrolle verwendet werden.
• Optimieren Sie die Konzentration des Primärantikörpers für jede Anwendung; Startwerte für WB liegen oft zwischen 1:500 und 1:2000, eine empirische Bestimmung wird jedoch empfohlen.
• Bewahren Sie den Antikörper während der Handhabung auf Eis auf und vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen, um die Aktivität zu erhalten.

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