Anti-Phospho-c-Myc (S62) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P und ELISA - P01106

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Myc-Protoonkogen-Proteins

• MYC (c-Myc) ist ein bekanntes Protoonkogen und Transkriptionsfaktor, auch bezeichnet als Klasse-E-Basic-Helix-Loop-Helix-Protein 39 (bHLHe39) oder Transkriptionsfaktor p64. Es wird vom MYC-Gen kodiert und ist eng mit Zellwachstum, Proliferation und Onkogenese verbunden.
• Als sequenzspezifischer Transkriptionsfaktor bindet MYC an das kanonische E-Box-Motiv 5'-CACGTG-3', um die Transkription zahlreicher wachstumsbezogener Gene zu aktivieren und so den Zellzyklusfortschritt und die Zellproliferation voranzutreiben.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:24940000 PMID:25956029
• MYC hochreguliert die VEGFA-Expression durch direkte Bindung an dessen Promotor und fördert dadurch die Sprossungsangiogenese in physiologischen und pathologischen Kontexten.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:24940000 PMID:25956029
• In embryonalen Stammzellen fungiert MYC als Schlüsselregulator der somatischen Reprogrammierung und Selbsterneuerung und arbeitet mit TAF6L zusammen, um die Freisetzung der RNA-Polymerase II und die Aktivierung von Zielgenen zu erleichtern (nach Ähnlichkeit).
• MYC reguliert die Expression von HNRNPA1, HNRNPA2 und PTBP1 positiv, welche gemeinsam das alternatives Spleißen der prä-mRNA der Pyruvatkinase PKM modulieren und die Produktion des PKM-M2-Isoforms begünstigen. Dieser Mechanismus ist für die bei vielen Krebsarten beobachtete metabolische Reprogrammierung entscheidend.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:20010808
• Subzellulär lokalisiert sich MYC überwiegend im Zellkern – spezifisch im Nukleoplasma und Nukleolus – kann aber auch in das Zytoplasma shuttle und mit Chromosomen assoziieren, was seine dynamische Rolle bei der Transkriptionsregulation und der Chromatindynamik widerspiegelt.
• Das Protein unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung an mehreren Serin- und Threoninresten (wie S62), Acetylierung, O-Glykosylierung und Ubiquitinierung. Diese Modifikationen regulieren die Stabilität, Aktivität und das Interaktom des MYC-Proteins streng.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wird gegen ein phosphospezifisches Immunogen (humanes c-Myc-Peptid, phosphoryliert an Ser62) hergestellt. Für Western Blot (WB) wird empfohlen, Zell- oder Gewebelysate mit Phosphatasehemmern herzustellen und die Phosphospezifität mittels λ-Phosphatase-Behandlung oder konkurrierendem nicht-phosphoryliertem Peptid zu validieren.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) werden Standard-Schritte zur Antigen-Retrieval und Blockierung empfohlen, und der Antikörper kann in mehreren Verdünnungen getestet werden, um das Signal-zu-Hintergrund-Verhältnis zu optimieren.
• In ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; jedoch ist eine individuelle Assay-Optimierung erforderlich, und die Kreuzreaktivität mit nicht-phosphoryliertem c-Myc sollte bewertet werden.
• Angesichts des vorhergesagten Proteingewichts von ca. 51 kDa sollte ein geeigneter Molekulargewichtsmarker verwendet und die korrekte Bande im relevanten Probenystem (z. B. humane, murine oder rattige Zelllinien) bestätigt werden.
• Erwägen Sie die Verwendung dieses Antikörpers in Kombination mit Gesamt-c-Myc-Antikörpern, um den Phosphorylierungsstatus in Signalstudien (z. B. MAPK/ERK-Weg) zu bewerten.

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