Anti-Phospho-BRCA1 (S988) Kaninchen-Polyclonalkörper für IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38398

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von BRCA1

• Brustkrebs-Typ-1-Suszeptibilitätsprotein (BRCA1), auch bekannt als RING-Finger-Protein 53 (RNF53), ist eine E3-Ubiquitin-Protein-Ligase, die spezifisch die Bildung von 'Lys-6'-verknüpften Polyubiquitinketten vermittelt und eine zentrale Rolle bei zellulären Antworten auf DNA-Schäden spielt. Zugehörige Referenzen: PMID:10500182 PMID:12887909 PMID:12890688
• Das BRCA1-BARD1-Heterodimer koordiniert diverse Signalwege wie DNA-Reparatur, Ubiquitinierung und Transkriptionsregulation, um die genomische Stabilität zu erhalten. Zugehörige Referenzen: PMID:12890688 PMID:14976165 PMID:20351172
• BRCA1 wird für korrekte Zellzyklusarretierungen nach ionisierender Bestrahlung sowohl in der S- als auch in der G2-Phase benötigt und trägt zur homologe Rekombinationsreparatur (HRR) durch Interaktion mit PALB2 und Feinabstimmung der Beladung von BRCA2-RAD51 an DNA-Brüchen bei. Zugehörige Referenzen: PMID:10724175 PMID:11836499 PMID:12183412 PMID:19369211
• Es reguliert die zentrosomale Mikrotubuli-Nukleation und hemmt die Lipidsynthese durch Bindung an inaktives phosphoryliertes ACACA, wodurch dessen Dephosphorylierung verhindert wird. Zugehörige Referenzen: PMID:18056443 PMID:16326698
• Der BRCA1-RBBP8-Komplex steuert die G2/M-Kontrollpunktaktivierung durch Ubiquitinierung von RBBP8, was einen direkten Regulationsmechanismus im Zellzyklusablauf nach DNA-Schäden darlegt. Zugehörige Referenzen: PMID:16818604
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zellkern, Chromosom und Zytoplasma mit dynamischem Shuttling, abhängig von Zellzyklusphase und DNA-Schäden-Signalen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung (z. B. an S988), Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Interaktionen modulieren.
• Isoform 1 und 3 sind weit verbreitet exprimiert; Isoform 3 ist in Brust- und Eierstockkrebszelllinien oft reduziert oder abwesend.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid rund um S988 des menschlichen BRCA1; die Antikörperspezifität für die phosphorylierte Form sollte durch Phosphatasebehandlung oder Konkurrenzassays bestätigt werden.
• Für IHC-P optimieren Sie die Antigen-Retrieval und erwägen Sie die Verwendung von Geweben mit bekannter BRCA1-Expression (z. B. Brust, Eierstock); fügen Sie eine Negativkontrolle mit einem nicht-phosphorylierten Blockierungspeptid hinzu.
• Bei IF/ICC kann eine Co-Färbung mit DNA-Schäden-Markern oder Zellzyklusphasenmarkern funktionalen Kontext für die BRCA1-Lokalisation liefern.
• Der ELISA-Nachweis von Phospho-BRCA1 kann eine sorgfältige Extraktion und Normalisierung auf Gesamt-BRCA1-Spiegel erfordern; validieren Sie Linearität und Sensitivität in der relevanten Probenmatrix.

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