Anti-Phospho-ATF2 (T69/T71) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P15336

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ATF-2-Funktion und -Lokalisierung

• ATF-2 (Activating Transcription Factor 2), auch bekannt als CREB-2, CRE-BP1 und HB16, ist ein Mitglied der ATF/CREB-Familie von Transkriptionsfaktoren mit Basisregion-Leucin-Zipper (bZIP), kodiert durch das ATF2-Gen.
• Fungiert als transkriptioneller Aktivator durch Bindung an CRE-(5'-TGACGTCA-3') oder AP-1-(5'-TGACTCA-3')-Konsensussequenzen und reguliert Gene, die an Anti-Apoptose, Zellwachstum und DNA-Schadensantwort beteiligt sind.
• Zeigt intrinsische Histone-Acetyltransferase-(HAT)-Aktivität, acetyliert spezifisch Histone H2B und H4 in vitro und trägt zur Chromatinmodifikation und transkriptionellen Regulation bei. Verwandte Referenzen: PMID:10821277
• Dieser phosphorylierungsspezifische Antikörper erkennt ATF2, das an Thr69 und Thr71 durch Kinasen wie ATM phosphoryliert wurde, was für seine Rolle in der DNA-Schadensantwort, dem durch ionisierende Strahlung induzierten S-Phasen-Checkpoint und die Rekrutierung des MRN-Komplexes an DNA-Schadensherde entscheidend ist.
• Im Zytoplasma lokalisiert sich ATF2 an die äußere Mitochondrienmembran, wo es mit HK1 und VDAC1 interagiert, das mitochondriale Membranpotential beeinträchtigt und den Zelltod fördert, was seine duale Rolle in der Transkription und Apoptose unterstreicht.
• Das Protein ist ubiquitär exprimiert, mit höheren Spiegeln im Gehirn, und unterliegt einem nukleo-zytoplasmatischen Shuttle; seine subzelluläre Lokalisierung umfasst den Zellkern, das Zytoplasma und die äußere Mitochondrienmembran.
• ATF2 kann abhängig vom Gewebekontext entweder onkogene oder tumorsuppressive Aktivitäten haben und moduliert die ATM-Aktivität durch Förderung des KAT5-Abbaus in Zusammenarbeit mit CUL3 und RBX1.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid hergestellt, das Thr69 und Thr71 von humanem ATF2 entspricht. Validieren Sie für den phosphorylierungsspezifischen Nachweis die Spezifität durch Behandlung von Zelllysaten mit Lambda-Phosphatase oder durch Verwendung einer Konkurrenz mit nicht-phosphoryliertem Peptid.
• Für Western Blotting beträgt das erwartete Molekulargewicht ca. 55 kDa. Verwenden Sie geeignete Blockier- und Waschbedingungen und erwägen Sie die Zugabe eines Phosphatase-Inhibitor-Cocktails zu den Lysepuffern, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) ist möglicherweise eine Antigen-Retrieval erforderlich; eine Optimierung der Antikörperverdünnung und des Detektionssystems wird für jeden Gewebetyp empfohlen. Fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-ATF2 ermöglicht die Verwendung des Antikörpers in Nagetiermodellen, jedoch werden Sequenzabgleiche und Vorversuche empfohlen, um die Reaktivität zu bestätigen.

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