Anti-Phospho-AMPKa1/AMPKa2-T183/T172 Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – Q13131 / P54646

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von AMPKa1/AMPKa2

• 5'-AMP-aktivierte Proteinkinase (AMPK) ist eine heterotrimere Serin/Threonin-Kinase, die als Energiesensor fungiert und die zelluläre Energiehomöostase aufrechterhält. Die katalytischen α-Untereinheiten (α1 kodiert durch PRKAA1 und α2 durch PRKAA2) werden durch Phosphorylierung an Thr-183 (α1) oder Thr-172 (α2) als Reaktion auf erhöhte AMP/ADP-Spiegel und vorgeschaltete Kinasen aktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:17307971, PMID:17712357

• AMPK reguliert den Lipidstoffwechsel durch Phosphorylierung von Acetyl-CoA-Carboxylase (ACACA/ACACB) und HMG-CoA-Reduktase, wodurch die Fettsäure- und Cholesterinsynthese gehemmt wird. Es fördert zudem die Lipolyse durch Phosphorylierung der hormonsensitiven Lipase (LIPE).

• Bei der Glukosehomöostase erhöht AMPK die Glukoseaufnahme im Muskel durch Förderung der Translokation von SLC2A4/GLUT4 und moduliert die hepatische Glukoneogenese durch Phosphorylierung von CRTC2/TORC2. Es reguliert zudem die glykolytischen Enzyme PFKFB2/3.

• AMPK steuert Zellwachstum und Proliferation durch Hemmung des mTORC1-Signalwegs über Phosphorylierung von TSC2 und RPTOR sowie durch Phosphorylierung von FNIP1 zur Unterdrückung nicht-kanonischer mTORC1-Signalgebung, wodurch Autophagie durch Aktivierung von ULK1 gefördert wird. Verwandte Referenzen: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:37079666

• Die Kinase phosphoryliert mehrere Transkriptionsfaktoren und Koregulatoren (z. B. FOXO3, p53, SREBF1/2, HNF4A, CRTC2, HDAC5, MEF2C, PPARGC1A, EP300), um langfristige Stoffwechsel- und Stressantworten auszuüben, und vermittelt die Chromatinregulation durch Phosphorylierung von Histon H2B. Verwandte Referenzen: PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171

• Die subzelluläre Lokalisation umfasst Zytoplasma, Zellkern und späte Endosomen, sodass AMPK Stoffwechsel- und Transkriptionsprogramme über verschiedene Kompartimente hinweg koordinieren kann. Es ist zudem an der Initiierung der Autophagie und der mitochondrialen Dynamik beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:34077757, PMID:36367943

• Weitere Funktionen umfassen die Regulation des zirkadianen Rhythmus durch Phosphorylierung von CRY1, die Wnt-Signalgebung durch Stabilisierung von CTNNB1 und die Tau-Proteinkinaseaktivität bei Exposition gegenüber Amyloid-Beta. AMPKα1 ist zudem über Phosphorylierung von ALDH7A1 an Ferrotose und Hypoxieantworten beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:31492851, PMID:40233740

• AMPKα1 unterliegt alternatives Spleißen und wird durch ubiquitin-ähnliche Konjugation (Ubl) modifiziert. Das Protein ist ein Glykoprotein und Phosphoprotein mit metallabhängiger Kinaseaktivität, die Magnesium erfordert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid um Thr-183 von menschlichem AMPKα1/α2 hergestellt; es wird empfohlen, die Phosphospezifität durch λ-Phosphatase-Behandlung von Zelllysaten oder Peptid-Konkurrenzexperimenten zu überprüfen.
• Für das Western Blotting ist eine Bande bei etwa 64–65 kDa (α1) und 62 kDa (α2) zu erwarten. Mehrere Banden können durch Isoformvariationen und unterschiedliche Phosphorylierungszustände entstehen; verwenden Sie geeignete Negativkontrollen (Blockierung mit nicht phosphoryliertem Peptid), um die Spezifität des Signals zu bestätigen.
• Dieser Antikörper ist für den enzymgebundenen Immunadsorptionstest (ELISA) geeignet; erwägen Sie die Paarung mit einem Gesamt-AMPKα-Antikörper, um Phosphosignale bei quantitativen Verfahren zu normalisieren.
• Aufgrund der hohen Sequenzkonservierung ist eine Kreuzreaktivität mit muriner und Ratten-AMPKα beschrieben; validieren Sie die Reaktivität im Kontext der entsprechenden Art und des Gewebes.

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