Anti-Phospho-AKT1 (Thr450) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P31749

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AKT1-Funktion und -Lokalisierung

• AKT1 ist das Gründungsmitglied der AKT-Serin/Threonin-Kinase-Familie, zu der auch AKT2 und AKT3 gehören, und steuert grundlegende Prozesse wie Stoffwechsel, Proliferation, Überleben, Wachstum und Angiogenese (PubMed:11882383, PubMed:15526160, PubMed:15861136). Verwandte Referenzen: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• In der Insulin-Signalkaskade phosphoryliert AKT1 TBC1D4, um die GLUT4-Translokation und Glukoseaufnahme zu fördern (PubMed:11994271), und hemmt GSK3, um die Glykogensynthese voranzutreiben. Verwandte Referenzen: PMID:11994271
• AKT1 unterstützt das Zellüberleben, indem es pro-apoptotische Proteine wie MAP3K5/ASK1 (PubMed:11154276) und BAD (PubMed:10926925) direkt phosphoryliert und inaktiviert und durch zytoplasmatische Retention von FOXO-Transkriptionsfaktoren (PubMed:10358075). Verwandte Referenzen: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:10358075
• Durch TSC2-Phosphorylierung aktiviert AKT1 mTORC1 und koppelt so Wachstumsfaktorsignale an Proteinsynthese, Ribosomenbiogenese und Zellwachstum (PubMed:12150915, PubMed:12172553). Verwandte Referenzen: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 pendelt zwischen Zytoplasma, Zellkern, Plasmamembran und mitochondrialem Intermembranraum; diese dynamische Lokalisierung ist entscheidend für den Zugang zu verschiedenen Downstream-Zielen.
• In humanen Geweben weit verbreitet, sind AKT1-Proteinspiegel und aktivierende Phosphorylierungen häufig in Krebserkrankungen erhöht, einschließlich Prostata- und Brustkrebs, wo sie mit dem Tumorfortschritt korrelieren.
• AKT1 unterliegt einer umfangreichen posttranslationalen Regulation: Phosphorylierung an Thr308 und Ser473 ist für volle Kinaseaktivität erforderlich, während Acetylierung, Ubiquitinierung und Glykosylierung seine Stabilität und Funktion weiter modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western Blot (WB) Zell- oder Gewebelysate mit Phosphataseinhibitoren vorbereiten, um das Phospho-Thr450-Signal zu erhalten; ein spezifisches Band bei etwa 56 kDa wird in humanen und murinen Proben erwartet.
• Bei ELISA-Anwendungen kann ein Phosphopeptid, das dem Immunogen entspricht, als Beschichtungsantigen verwendet werden, um den Antikörper einzufangen; Anwender sollten Beschichtungskonzentrationen und Antikörperverdünnungen für ihren spezifischen Assay optimieren.
• Da polyklonale Antikörper von Charge zu Charge variieren können, wird die Einbeziehung geeigneter positiver und negativer Kontrollen (z. B. Phosphatase-behandelte Lysate) empfohlen.
• Dieser Antikörper ist für den Forschungsgebrauch zum Nachweis der AKT1-Phosphorylierung bestimmt; eine Validierung in der Probenmatrix und dem Assaysystem des Endanwenders ist für zuverlässige Ergebnisse unerlässlich.

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