Anti-Phospho-AKT1 (T450) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P31749

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AKT1-Funktion und -Lokalisierung

• AKT1 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, eine von drei eng verwandten AKT-Isoformen (AKT1, AKT2, AKT3), auch bekannt als Proteinkinase B (PKB), die verschiedene zelluläre Prozesse wie Stoffwechsel, Proliferation, Überleben, Wachstum und Angiogenese regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• AKT1 vermittelt die Signalübertragung stromabwärts der Phosphoinositid-3-Kinase (PI3K) als Reaktion auf Wachstumsfaktoren wie Insulin, IGF1, EGF und PDGF und phosphoryliert ein breites Spektrum an Substraten. Verwandte Referenzen: PMID:12176338, PMID:12964941
• Die Phosphorylierung von TSC2 an Ser-939 und Thr-1462 durch AKT1 führt zur Aktivierung des mTORC1-Signalwegs, was die Proteinsynthese und das Zellwachstum fördert. Verwandte Referenzen: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 reguliert das Zellüberleben durch Phosphorylierung und Hemmung pro-apoptotischer Faktoren wie MAP3K5 (ASK1) und BAD sowie durch Aktivierung von Überlebens-Transkriptionsfaktoren wie CREB1. Verwandte Referenzen: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:9829964
• AKT1 reguliert den insulinstimulierten Glukosetransport durch Phosphorylierung von TBC1D4, was die Bindung an 14-3-3-Proteine auslöst und die Translokation von GLUT4 zur Zelloberfläche erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:11994271
• AKT1 pendelt zwischen dem Zytoplasma, dem Zellkern, der Zellmembran und dem mitochondrialen Intermembranraum, wobei die Phosphorylierung an Thr450 (und anderen Stellen) seine Aktivierung und Lokalisierung beeinflusst.
• Die Kinase wird ubiquitär in humanen Geweben exprimiert, wobei erhöhte Proteinspiegel und Phosphorylierung bei Prostata- und Brustkrebs beobachtet werden, was ihre Rolle als Proto-Onkogen unterstreicht.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität, Stabilität und Interaktionen modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid, das den Resten um Thr450 von humanem AKT1 entspricht. Stellen Sie sicher, dass Ihre experimentellen Bedingungen die Proteinphosphorylierung erhalten; erwägen Sie die Verwendung von Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung.
• Für Western Blot (WB) ist der Antikörper so konzipiert, dass er spezifisch phosphoryliertes AKT1 an Thr450 erkennt. Validieren Sie die Signalspezifität bei Bedarf mit Phosphatase-behandelten Lysaten oder einer Kontrolle mit nicht-phosphoryliertem Peptid-Blockierung.
• Der Antikörper ist für ELISA-Anwendungen geeignet. Erwägen Sie die Optimierung von Beschichtungs- und Detektionsbedingungen unter Verwendung von gereinigtem phosphoryliertem AKT1-Protein oder -Peptid.
• Kreuzreaktivität wurde mit humanem und Ratten-AKT1 nachgewiesen. Überprüfen Sie bei Bedarf die Reaktivität mit anderen Spezies, da AKT1 T450 hochkonserviert ist, aber leichte Variationen aufweisen kann.
• Angesichts der Rolle von AKT1 in mehreren Signalwegen verwenden Sie geeignete Stimuli (z. B. Insulin, Wachstumsfaktoren), um die Phosphorylierung an Thr450 in Ihrem experimentellen Modell zu induzieren.

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