Anti-Phospho-AKT1-S473 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P31749

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: RAC-alpha Serin/Threonin-Proteinkinase (AKT1) Funktion und Lokalisierung

• AKT1 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die über die Phosphorylierung nachgeschalteter Substrate den Metabolismus, die Proliferation, das Zellüberleben, das Wachstum und die Angiogenese reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• Sie phosphoryliert TBC1D4, um den insulin-stimulierten Glukosetransport zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:11994271
• Durch Phosphorylierung von TSC2 aktiviert AKT1 den mTORC1-Signalweg und verbessert so die Proteinsynthese. Verwandte Referenzen: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 fördert das Zellüberleben, indem sie MAP3K5/ASK1 an Ser-83 phosphoryliert, um oxidativen Stress-induzierte Apoptose zu hemmen. Verwandte Referenzen: PMID:11154276
• Sie phosphoryliert FOXO-Transkriptionsfaktoren (FOXO1, FOXO3, FOXO4), um sie aus dem Zellkern auszuschließen und die Expression pro-apoptotischer Gene zu unterdrücken. Verwandte Referenzen: PMID:10358075
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Zellkern, Zellmembran und mitochondrialen Intermembranraum, was ihre vielfältigen Signalrollen widerspiegelt.
• AKT1 wird in allen humanen Zelltypen exprimiert, mit erhöhten Spiegeln in Prostata- und Brustkrebs; die Phospho-Ser473-Form ist mit dem Fortschreiten von Krebs assoziiert.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung an Ser473 und Thr308 für volle Aktivierung sowie Acetylierung und Glykosylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein synthetisches Phosphopeptid um Ser473 von humanem Akt1 hergestellt. Das Immunogen-Design zielt auf die aktivierte Form von Akt1 ab; nicht-phosphoryliertes Akt1 wird möglicherweise nicht detektiert.
• Für den Western Blot (WB) sollten Phosphatase-Inhibitoren während der Probenvorbereitung verwendet werden, um den Phosphorylierungszustand zu erhalten. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt 56 kDa (P31749).
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) können Antigen-Retrieval-Bedingungen und Gewebefixierung die Detektion des Phospho-Epitops beeinflussen; validieren Sie dies in bekannten Positivkontrollgeweben (z.B. Krebsproben).
• Für ELISA stellen Sie sicher, dass die Beschichtungsbedingungen das Phospho-Epitop erhalten; der Antikörper kann in Kombination mit einem Antikörper zur Detektion von Gesamt-Akt1 für eine Phospho/Gesamt-Verhältnisanalyse verwendet werden.
• Eine Kreuzreaktivität mit murinem und Rattens-Akt1 wird aufgrund der Sequenzhomologie erwartet; Unterschiede in der Zugänglichkeit der Phosphorylierungsstelle können eine speziesspezifische Validierung erfordern.

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