Anti-Phospho-Akt-S473 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AKT1-Funktion und Lokalisierung

• AKT1 (RAC-alpha Serin/Threonin-Proteinkinase) ist ein Mitglied der AKT-Kinasefamilie und reguliert Stoffwechsel, Proliferation, Zellüberleben, Wachstum und Angiogenese durch Phosphorylierung von über 100 nachgeschalteten Substraten. Verwandte Referenzen: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136 PMID:21432781
• Es vermittelt die Insulin-induzierte Glukoseaufnahme über SLC2A4/GLUT4-Translokation und stimuliert die Glykogensynthese durch Hemmung von GSK3 via Phosphorylierung.
• AKT1 fördert das Zellüberleben durch Phosphorylierung und Hemmung pro-apoptotischer Proteine, einschließlich MAP3K5/ASK1 und BAD. Verwandte Referenzen: PMID:11154276 PMID:10926925
• Es aktiviert den mTORC1-Signalweg durch Phosphorylierung von TSC2, was zu erhöhter Proteinsynthese und Zellwachstum führt. Verwandte Referenzen: PMID:12150915 PMID:12172553
• AKT1 lokalisiert im Zytoplasma, Zellkern, Zellmembran und im Intermembranraum der Mitochondrien, was vielfältige Signalrollen ermöglicht.
• Die Expression ist in Prostata- und Brustkrebs erhöht, und die Tyr-176-phosphorylierte Form korreliert mit dem Tumorfortschritt von normalen zu metastatischen Stadien.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung an Thr-308 und Ser-473 für volle Aktivierung, Acetylierung, Ubiquitinierung und Disulfidbindungsbildung, wie in UniProt-Keywords vermerkt.
• Der Antikörper zielt auf phosphoryliertes Ser-473, eine kritische Aktivierungsstelle, die bei AKT1 (P31749), AKT2 (P31751) und AKT3 (Q9Y243) konserviert ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches phosphoryliertes Peptid um Ser-473 von humanem AKT1; dieses Design gewährleistet hohe Spezifität für das phosphorylierte Epitop.
• Für Western Blot: Phosphatase-Inhibitoren im Lysepuffer verwenden und eine Blockierung mit niedrigprozentigem BSA in Betracht ziehen, um Phospho-Signale zu erhalten.
• Für IHC‑P: Antigen-Retrieval optimieren (z.B. Citratpuffer pH 6.0) und die Färbung in Proben mit bekannter AKT-Pfad-Aktivierung validieren, z.B. PTEN-defiziente Tumore.
• Für ELISA: Der Antikörper kann als Capture- oder Detektionsreagenz dienen; Kreuztitrationsexperimente durchführen, um die Kompatibilität mit Ihrem Assay-Format und Pufferbedingungen zu bestätigen.
• Stets geeignete positive (z.B. Insulin- oder Wachstumsfaktor-behandelte Zelllysate) und negative (unbehandelte oder Phosphatase-behandelte) Kontrollen einschließen, um die Phospho-Spezifität zu verifizieren.

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