Anti-Phospho-Acetyl-CoA-Carboxylase 1 (S79) Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q13085

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Acetyl-CoA-Carboxylase 1 (ACC1)

• Acetyl-CoA-Carboxylase 1 (ACC1) wird vom ACACA-Gen kodiert, auch bekannt als ACC1 oder ACCA, und ist das geschwindigkeitsbestimmende Enzym in der de novo-Fettsäurebiosynthese.
• Es katalysiert die ATP-abhängige Carboxylierung von Acetyl-CoA zu Malonyl-CoA in einer zweistufigen Reaktion unter Beteiligung einer Biotin-Carboxyl-Carrier-Domäne (PubMed:20457939, PubMed:20952656, PubMed:29899443). Verwandte Referenzen: PMID:20457939 PMID:20952656 PMID:29899443
• Das Enzym lokalisiert im Zytosol.
• Gewebeexpression wird in Gehirn, Plazenta, Skelettmuskel, Nieren-, Pankreas- und Fettgewebe beobachtet; geringe Expression in Lunge; und kein Nachweis in Leber.
• ACC1 ist eine biotinabhängige Carboxylase mit Bindungsstellen für ATP und Metallionen (Mg2+, Mn2+). Es unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung.
• Es spielt eine kritische Rolle im Lipidstoffwechsel, indem es die Synthese langkettiger Fettsäuren reguliert, die für die Membranbiogenese und Energiespeicherung essentiell sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting verwenden Sie ein Gel mit niedrigem Prozentsatz (z.B. 6%), um das ~266 kDa ACC1-Protein aufzulösen, und fügen Sie Phosphataseinhibitoren während der Lyse hinzu, um die Phosphorylierung an S79 zu erhalten.
• Überprüfen Sie die Antikörperspezifität durch Vorinkubation des Antikörpers mit einem nicht-phosphorylierten S79-Peptid, um die phosphoabhängige Bindung zu bestätigen.
• Bei Immunfluoreszenz oder ICC ist eine zytoplasmatische Färbung zu erwarten; färben Sie mit einem zytosolischen Marker zur Validierung der Lokalisierung mit.
• Für ELISA kann das phosphorylierte Peptid-Immunogen als positive Kontrolle verwendet werden; stellen Sie sicher, dass das Beschichtungspuffer mit Phosphopeptiden kompatibel ist.
• Validieren Sie den Antikörper in relevanten Zelllinien, die ACC1 exprimieren (z.B. HepG2, 3T3-L1), mit und ohne AMPK-Aktivierung, um die phosphorylierungsinduzierbare Detektion zu testen.

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