Anti-PHLPP1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60346

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PHLPP1-Funktion und -Lokalisierung

• PHLPP1 (PH-Domäne-Leucin-reiche Wiederholungen enthaltende Proteinphosphatase 1) ist eine Ser/Thr-Proteinphosphatase, die spezifisch das hydrophobe Motiv von AGC-Kinasen, einschließlich 'Ser-473' von AKT2 und AKT3, dephosphoryliert, was zu Apoptose und Unterdrückung des Tumorwachstums führt. Verwandte Referenzen: PMID:15808505 | PMID:17386267 | PMID:18162466
• Sie dephosphoryliert auch PRKCA und PRKCB, was zu deren Destabilisierung und Abbau führt, und wirkt auf andere Ziele wie STK4 und RPS6KB1, um Apoptose und Translation zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:18162466 | PMID:20513427 | PMID:21986499
• PHLPP1 fungiert als Tumorsuppressor, hemmt die Krebszellproliferation und dephosphoryliert RAF1, um dessen Kinaseaktivität zu hemmen. Verwandte Referenzen: PMID:19079341 | PMID:24530606
• Das Protein enthält eine PH-Domäne und Leucin-reiche Wiederholungen und wird in mehreren subzellulären Kompartimenten exprimiert, einschließlich Zytoplasma, Zellkern und Zellmembran.
• Es wird ubiquitär in nicht-kanzerösem Gewebe exprimiert, aber die Expression geht in kolorektalen Tumoren oft verloren oder ist vermindert; Isoform 2 spielt eine Hauptrolle in hippocampalen Neuronen.
• PHLPP1 ist an der Regulation des zirkadianen Rhythmus und der hippocampusabhängigen Langzeitgedächtnisbildung beteiligt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung; es wird alternativ gespleißt, um mehrere Isoformen zu erzeugen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen ein C-terminales rekombinantes Fragment (aa 1160-1428) entwickelt. Überprüfen Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen System, da der endogene Proteinkontext die Epitopzugänglichkeit beeinflussen kann.
• Für Western Blot (WB) liegt das vorhergesagte Band bei etwa 185 kDa; verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und ziehen Sie ein Gel mit hohem Prozentgehalt oder ein Gradientengel für eine optimale Auflösung in Betracht.
• Für IHC-P sollten Antigen-Retrieval-Methoden optimiert werden; schließen Sie geeignete positive und negative Kontrollgewebe ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für IF/ICC können Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen die Färbung beeinflussen; testen Sie verschiedene Protokolle, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erreichen.
• Dem Antikörper wird eine Kreuzreaktivität mit humanem, murinem und ratten PHLPP1 nachgesagt; validieren Sie dies in relevanten Speziesproben, wenn er darüber hinaus verwendet wird.

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