Anti-PHKA1-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P46020

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PHKA1-Funktion und -Lokalisierung

• PHKA1 kodiert die alpha-regulatorische Untereinheit der Phosphorylase-b-Kinase (PhK), eines Komplexes, der die Glykogenphosphorylase aktiviert, um den Glykogenabbau einzuleiten.
• Alternatives Spleißen erzeugt mindestens zwei Isoformen: Isoform 1 überwiegt in der Skelettmuskulatur (z. B. Musculus vastus lateralis), während Isoform 2 im Herzen leicht überwiegt und in anderen Geweben klar dominiert.
• Es wird angenommen, dass die Alpha-Untereinheit Calmodulin bindet und damit die Kalziumsignalisierung mit der Glykogenolyse verknüpft; PhK phosphoryliert Serinreste auf Substraten wie Troponin I.
• Studien zur subzellulären Lokalisierung verorten diese regulatorische Untereinheit an der Zellmembran, was auf eine Rolle in membranassoziierten Enzymkomplexen hindeutet.
• Mutationen im PHKA1-Gen sind eine Ursache für die Glykogenspeicherkrankheit Typ IX (GSD IX), eine Stoffwechselstörung, die durch eine gestörte Glykogenverstoffwechselung gekennzeichnet ist und hauptsächlich die Skelettmuskulatur betrifft.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Prenylierung (daher seine Assoziation mit Membranen) und Phosphorylierung, die seine Aktivität regulieren können.
• Eine dreidimensionale Struktur des Proteins wurde aufgeklärt und bietet Einblick auf atomarer Ebene in die Domänenorganisation und potenzielle regulatorische Schnittstellen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 600–820) erstreckt sich über einen C-terminalen Bereich des humanen PHKA1; überprüfen Sie die Antikörperspezifität mithilfe geeigneter positiver und negativer Kontrollen (z. B. Lysate von PHKA1-Knockout-Zellen) für Ihre Anwendung.
• Für Western Blots liegen typische Arbeitsverdünnungen für kaninchenpolyklonale Antikörper zwischen 1:500 und 1:5000; die optimale Konzentration muss empirisch basierend auf dem Probentyp und dem Detektionssystem ermittelt werden.
• In ELISA-Assays kann dieser Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz dienen; die Assaybedingungen (Konzentration zur Beschichtung, Blockierungsmittel, Inkubationszeiten) erfordern eine Optimierung durch den Endanwender.
• Der Antikörper wurde mit humanen und murinen Proben validiert. Für andere Spezies sollten Sie die Sequenzhomologie des Immunogenbereichs prüfen und vor großangelegten Experimenten Pilot-Western-Blots durchführen.
• Der Versand in Eisbeuteln kann den Antikörper leichten Temperaturschwankungen aussetzen; nach Erhalt aliquotieren und bei −20 °C oder −80 °C lagern, um wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen zu vermeiden und die langfristige Stabilität zu gewährleisten.

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