Anti-PHGDH Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - O43175

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PHGDH-Funktion und -Lokalisierung

• PHGDH (D-3-Phosphoglycerat-Dehydrogenase) ist ein metabolisches Enzym, das den ersten Schritt im phosphorylierten L-Serin-Biosyntheseweg katalysiert und dabei 3-Phospho-D-Glycerat in 3-Phosphonooxypyruvat umwandelt.
• Zusätzlich zeigt PHGDH 2-Oxoglutarat-Reduktase- und Malat-Dehydrogenase-Aktivitäten und katalysiert die reversible Oxidation von 2-Hydroxyglutarat zu 2-Oxoglutarat und (S)-Malat zu Oxalacetat.
• Das Protein wird durch das PHGDH-Gen (auch bekannt als PGDH3) kodiert, das sich auf dem menschlichen Chromosom 1 befindet.
• Schlüsselwörter, die mit PHGDH verbunden sind, umfassen Aminosäurebiosynthese, Serinbiosynthese, NAD, Oxidoreduktase und posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung, Phosphoprotein, Isopeptidbindung und Ubl-Konjugation.
• PHGDH wurde mit Krankheitsvarianten in Verbindung gebracht (Schlüsselwort für Krankheitsvariante) und ist ein Ziel der Proteomik-Identifizierung (Schlüsselwort für Proteomik-Identifizierung).
• Das berechnete Molekulargewicht von PHGDH beträgt ca. 57 kDa (UniProt: 56.651 Da).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 264-533 von menschlichem PHGDH (NP_006614.2), einem Bereich innerhalb der C-terminalen Domäne. Es wird erwartet, dass es das全长-PHGDH erkennt und möglicherweise trunkierte Varianten, die dieses Epitop enthalten.
• Für den Western Blot (WB) sollten Sie die Verwendung von Standarddenaturierungsbedingungen in Betracht ziehen und die Detektion mit positiven Kontrollen wie Zelllinien mit bekannter PHGDH-Expression (z. B. HeLa, HEK293T) validieren. Bestätigen Sie die Bandspezifität in der Nähe des vorhergesagten Molekulargewichts von 57 kDa.
• Optimieren Sie bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) die Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle für eine zuverlässige Visualisierung der PHGDH-Lokalisierung. Fügen Sie geeignete Kontrollen hinzu, um die Antikörperspezifität zu bewerten.
• Für die Immunpräzipitation (IP) überprüfen Sie die Fähigkeit des Antikörpers, PHGDH aus Lysaten anzureichern, unter Verwendung der empfohlenen Puffer, und bestätigen Sie die Pull-Down-Effizienz per WB.
• Bei Verwendung in ELISA sollten Sie die Paarung mit einem geeigneten Detektionsantikörper in Betracht ziehen und gegen rekombinantes PHGDH oder endogene Ziele in Probenmatrizes validieren.

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