Anti-PHF8 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9UPP1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PHF8-Funktion und Lokalisierung

• PHF8 (KDM7B/JHDM1F/ZNF422) ist eine Histon-Lysin-Demethylase, die bevorzugt mono- und dimethylierte Markierungen von H3K9 und H4K20 entfernt und repressives Chromatin in einen aktiven Zustand überführt. Verwandte Referenzen: PMID:20101266, PMID:20208542, PMID:20346720
• Sie ist entscheidend für den Zellzyklusfortschritt durch Kontrolle des G1-S-Übergangs und für die ribosomale DNA-Transkription als Koaktivator der RNA-Polymerase I. Verwandte Referenzen: PMID:20622854, PMID:20531378
• Die Demethylase-Aktivität gegenüber H3K9me2 wird durch Bindung an trimethyliertes H3K4 (H3K4me3) stark stimuliert, was eine Auslesung von aktivem Chromatin ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:20023638, PMID:20346720, PMID:20421419
• PHF8 wirkt synergistisch mit dem Transkriptionsfaktor ARX, um KDM5C hochzuregulieren und die Anreicherung von H3K4me3 an regulatorischen Elementen zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:31691806
• Das Protein ist im Zellkern und Nukleolus lokalisiert, was mit seinen regulatorischen Rollen für Chromatin und rDNA übereinstimmt.
• Es besitzt einen PHD-Finger, der H3K4me3 bindet, eine JmjC-katalytische Domäne und eine Zinkfinger-Domäne (ZNF422), was es als Chromatin-Regulator klassifiziert.
• Erforderlich für die normale Gehirnentwicklung; Funktionsverlustmutationen sind mit X-chromosomaler geistiger Behinderung (MRXSSD) verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 800-900 von humanem PHF8 entspricht, was darauf hindeutet, dass der Antikörper die C-terminale Region des Proteins erkennen könnte.
• Für Western Blot: PHF8 hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von etwa 118 kDa; stellen Sie geeignete Gelprozente und Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine sicher.
• Aufgrund seiner nukleären Lokalisierung werden Kernextraktion oder Ganzzelllysate für den Nachweis empfohlen; erwägen Sie eine Validierung in humanen und murinen Zelllinien, die PHF8 exprimieren (z.B. HeLa, HEK293, murine embryonale Fibroblasten).
• Für ELISA kann das direkte oder Sandwich-Format verwendet werden; eine Optimierung von Beschichtungsantigen und Antikörperkonzentration wird empfohlen.
• Als Histonmodifikator mit zellzyklusabhängiger Expression kann die Signalintensität variieren; verwenden Sie geeignete Ladekontrollen und normalisieren Sie auf Zellzahl oder Gesamtprotein.

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