Anti-PGP9.5/UCHL1 Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P09936

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PGP9.5/UCHL1-Funktion und Lokalisierung

• PGP9.5/UCHL1, auch bekannt als neuronales zytoplasmatisches Protein 9.5 oder Ubiquitin-Thioesterase L1, ist ein Mitglied der Ubiquitin-Carboxy-terminalen Hydrolase-Familie und fungiert als Deubiquitinase, die für die Aufrechterhaltung des Ubiquitin-Proteasom-Systems essentiell ist.

• Es erkennt spezifisch und hydrolysiert das C-terminale Glycin von Ubiquitin und erhält so einen stabilen Pool an freiem Monoubiquitin, der sowohl für Ubiquitin-Proteasom- als auch für Autophagie-Lysosom-Abbauwege kritisch ist.
  Verwandte Referenzen: PMID:12408865 PMID:8639624 PMID:9774100

• UCHL1 ist an verschiedenen physiologischen Prozessen beteiligt, einschließlich der Aufrechterhaltung der synaptischen Funktion, der Herzfunktion, der Regulation von Entzündungsreaktionen und der Osteoklastogenese.
  Verwandte Referenzen: PMID:22212137 PMID:23359680

• Das Enzym deubiquitiniert und stabilisiert mehrere Substratproteine wie WWTR1/TAZ, EGFR, HIF1A und BACE1 und moduliert so Signalwege, die an Zellwachstum, Hypoxiereaktion und Neurodegeneration beteiligt sind.
  Verwandte Referenzen: PMID:22212137 PMID:25615526

• Durch seine Wirkung auf BACE1 fördert UCHL1 den Abbau der Beta-Stelle Amyloid-Vorläuferprotein-spaltenden Enzyms 1, was zu einer verringerten Produktion von Amyloid-beta-Peptiden führt – einem Kennzeichen der Alzheimer-Krankheitspathologie.
  Verwandte Referenzen: PMID:22212137

• Subzellulär lokalisiert UCHL1 überwiegend im Zytoplasma und ist auch mit der Membran des endoplasmatischen Retikulums assoziiert.

• Die Gewebeexpression ist in Neuronen am höchsten, wobei das Protein in Zellkörpern und Fortsätzen im gesamten Neokortex nachgewiesen wird; es ist auch in Zellen des diffusen neuroendokrinen Systems und deren Tumoren vorhanden, jedoch nur schwach im Eierstock. Bemerkenswerterweise sind die UCHL1-Spiegel in Hirngeweben von Patienten mit Parkinson-Krankheit und Alzheimer-Krankheit herunterreguliert.

• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung, Oxidation und Prenylierung, und genetische Varianten wurden mit hereditärer spastischer Paraplegie, Parkinson-Krankheit und anderen neurodegenerativen Erkrankungen in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western-Blot-Nachweis ist eine Bande von etwa 25 kDa zu erwarten; aufgrund möglicher posttranslationaler Modifikationen und Proteinaggregation kann das beobachtete Molekulargewicht jedoch variieren.

• Humanes Hirngewebelysat oder Neuroblastom-Zelllinien (z. B. SH-SY5Y) können aufgrund der neuronalen Expression von UCHL1 als positive Kontrollen dienen; Maushirnproben können ebenfalls zur Bestätigung der Kreuzreaktivität verwendet werden.

• Bei ELISA-Anwendungen sollte die Beschichtung mit dem rekombinanten Immunogen (aa 59-223) als Standard in Betracht gezogen werden, und geeignete negative Kontrollen sollten zur Beurteilung der Spezifität eingeschlossen werden.

• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, der gegen ein rekombinantes Fusionsprotein hergestellt wurde, sollte die Chargen-zu-Charge-Konsistenz überprüft werden, und Präadsorptionsschritte können bei Bedarf helfen, unspezifische Bindung zu reduzieren.

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