Anti-PGHS-2-Polyklonaler Antikörper für WB - P35354

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: PGHS-2 (COX-2/PTGS2) Funktion und Lokalisierung

• Prostaglandin-G/H-Synthase 2 (PGHS-2), auch bekannt als Cyclooxygenase-2 (COX-2), ist ein bifunktionelles Enzym, das die Umwandlung von Arachidonsäure in Prostaglandin H2 (PGH2) durch aufeinanderfolgende Cyclooxygenase- und Peroxidase-Reaktionen katalysiert.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:16373578, PMID:26859324
• Sie spielt eine entscheidende Rolle bei der Entzündungsreaktion durch die Produktion entzündungsfördernder Prostanoide, und ihre Expression wird schnell durch Zytokine, Wachstumsfaktoren und Mitogene induziert.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:11939906, PMID:16373578, PMID:19540099
• Neben Arachidonsäure metabolisiert PGHS-2 andere mehrfach ungesättigte Fettsäuren wie Dihomo-γ-Linolensäure und Eicosapentaensäure, um alternative Serien von Prostaglandinen und spezialisierte Pro-resolving Mediatoren (Resolvine) aus Docosahexaensäure und Eicosapentaensäure zu erzeugen.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:11939906, PMID:19540099, PMID:12391014
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst die Membran des endoplasmatischen Retikulums, Mikrosomen sowie die innere und äußere Kernmembran, was eine kompartimentspezifische Prostanoid-Synthese erleichtert.
• Das Protein wird posttranslational durch N-Glykosylierung, Acetylierung und S-Nitrosylierung modifiziert, und seine katalytische Aktivität beruht auf einem Häm-haltigen aktiven Zentrum mit gebundenem Eisen.
• PGHS-2 ist ein Mitglied der Prostaglandin-G/H-Synthase-Familie und ist für die Biosynthese von Lipidmediatoren in verschiedenen Geweben unerlässlich.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid, das die Aminosäuren 505–604 von humanem PGHS-2 abdeckt, eine Region nahe des C-Terminus. Dieses Design kann eine hohe Spezifität für das humane Protein verleihen; jedoch sollte die Kreuzreaktivität mit Orthologen anderer Arten bei Bedarf experimentell validiert werden.
• Für die Western-Blot-Analyse wandert PGHS-2 typischerweise bei etwa 69–72 kDa unter reduzierenden Bedingungen. Wir empfehlen die Verwendung von Positivkontrollen-Lysaten aus Zellen, von denen bekannt ist, dass sie COX-2 exprimieren (z. B. LPS-stimulierte humane Monozyten oder Kolorektalkarzinom-Zelllinien), um die Bandenidentität zu bestätigen.
• Als polyklonaler Antikörper erkennt er mehrere Epitope auf dem Zielprotein und bietet eine hohe Empfindlichkeit. Dennoch ist die Optimierung von Blockierungsreagenzien, Antikörperverdünnung und Inkubationsbedingungen für ein minimales Hintergrundrauschen und das beste Signal-Rausch-Verhältnis unerlässlich.
• Bei Erhalt den Antikörper bei -20°C lagern; vermeiden Sie wiederholte Gefrier- und Auftauzyklen, um die Bindungsaktivität zu erhalten.

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