Anti-PFKL Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P17858

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PFKL

• PFKL (ATP-abhängige 6-Phosphofruktokinase, Lebertyp), auch bekannt als PFK-B, PFK-L oder Phosphohexokinase, ist ein ~85 kDa großes glykolytisches Enzym der Phosphofruktokinase-Familie.
• Katalysiert die Phosphorylierung von D-Fruktose-6-Phosphat zu Fruktose-1,6-bisphosphat durch ATP, der ersten verbindlichen Schritt der Glykolyse (PubMed:22923583). Verwandte Referenzen: PMID:22923583
• Reguliert den oxidativen Burst von Phagozyten als Antwort auf bakterielle Infektion negativ, indem es die zelluläre NADPH-Biosynthese kontrolliert; nach der Makrophagenaktivierung treibt es den metabolischen Wechsel zur Glykolyse an und reduziert den Glukoseumsatz über den Pentosephosphatweg.
• Lokalisiert hauptsächlich im Zytoplasma, was mit seiner Rolle bei der Glykolyse übereinstimmt.
• Funktioniert als allosterisches Enzym, das durch ATP und andere Metaboliten reguliert wird; es unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen; das Protein wurde durch direkte Proteinsequenzierung und Proteomanalysen identifiziert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das dem C-terminalen Bereich (Aa 680–780) von humanem PFKL entspricht – diese konservierte Sequenz liegt wahrscheinlich der nachgewiesenen Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte zugrunde.
• Für das Western Blotting ist eine Hauptbande nahe 85 kDa zu erwarten; optimieren Sie bei Bedarf Probenlyse und Elektrophoresebedingungen, um eine klare Trennung zu erreichen.
• Bei IHC-P kann die Verwendung geeigneter Antigen-Retrieval-Methoden und die Validierung mit bekannten positiven und negativen Gewebekontrollen die Spezifität der Färbung verbessern.
• Für ELISA kann der Antikörper sowohl als Capture- als auch als Detektionsreagenz getestet werden; empirische Tests werden empfohlen, um optimale Paarungen und Konzentrationen zu ermitteln.
• Als Kaninchen-monoklonaler Antikörper bietet er eine konsistente Charge-zu-Charge-Leistung, was vorteilhaft für die Entwicklung reproduzierbarer Immunoassays ist.

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