Anti-PFDN5 Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q99471

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PHDN5-Funktion und -Lokalisierung

• PFDN5, auch bekannt als Prefoldin-Untereinheit 5 oder Myc-Modulator 1 (MM-1), ist eine Komponente des Prefoldin-Chaperon-Komplexes, der die Proteinfaltung erleichtert.
• Es bindet spezifisch an zytosolisches Chaperonin (c-CPN) und überträgt neu entstehende Polypeptidketten, um die Faltung in einer wettbewerbsintensiven Umgebung von nicht-nativen Proteinen zu fördern.
• PFDN5 fungiert auch als transkriptioneller Repressor durch Bindung an MYC und Hemmung der MYC-vermittelten transkriptionellen Aktivität.
• Das Protein lokalisiert sowohl im Zellkern als auch im Zytoplasma, was ihm die Teilnahme an Chaperon-Funktionen und der transkriptionellen Regulation ermöglicht.
• PFDN5 unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung, die seine Aktivität und Wechselwirkungen modulieren können.
• Das Gen durchläuft alternatives Spleißen, was potenziell mehrere Protein-Isoformen mit unterschiedlichen Funktionen generieren kann.
• PFDN5 ist stark in der Bauchspeicheldrüse und der Skelettmuskulatur exprimiert, mit mäßiger Expression in anderen Geweben, was auf gewebsspezifische Rollen bei der Proteinhomöostase und MYC-Regulation hindeutet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot (WB) wird aufgrund des kleinen vorhergesagten Molekulargewichts (~17 kDa) ein 15%iges oder Gradienten-Gel empfohlen. Fügen Sie geeignete Molekulargewichtsmarker hinzu.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, können mehrere Isoformen oder Bänder erkannt werden, die durch alternatives Spleißen oder posttranslationale Modifikationen entstehen. Validieren Sie die Spezifität mithilfe von Kontrolllysaten oder Knockdown-Proben.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist sowohl eine Kern- als auch eine Zytoplasma-Färbung zu erwarten. Verwenden Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, um Epitope zu erhalten.
• Für ELISA sollten Sie die Verwendung von rekombinantem PFDN5 oder Zelllysaten aus Geweben mit hoher Expression (z. B. Bauchspeicheldrüse, Skelettmuskulatur) in Betracht ziehen, um die Beschichtungs- und Nachweisbedingungen zu optimieren.
• Bei der Verwendung von Maus- oder Rattenproben sollten Sie die Kreuzreaktivität in der entsprechenden Spezies durch Pilotexperimente überprüfen, da die Kreuzreaktivität vorhergesagt, aber bestätigt werden sollte.
• Der Antikörper zielt auf die N-terminale Region 1-154 ab, die in allen bekannten Isoformen vorhanden sein kann; überprüfen Sie jedoch die Sequenzkonservierung über Spezies- und Spleißvarianten hinweg.

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