Anti-PEX5 Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P50542

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PEX5-Funktion und -Lokalisierung

• PEX5, auch bekannt als Rezeptor für peroxisomales Targeting-Signal 1 (PTS1-Rezeptor), PTS1-BP oder Peroxin-5, ist eine Schlüsselkomponente des Importsystems für peroxisomale Proteine, die durch alternatives Spleißen in mehreren Isoformen existiert.
• Vermittelt den peroxisomalen Import von Proteinen, die ein C-terminales PTS1-Typ-Tripeptid-Peroxisomales-Targeting-Signal (SKL-Typ) enthalten, indem es im Zytosol an die Frachtproteine bindet und sie durch das PEX13-PEX14-Docking-Komplex in die peroxisomale Matrix transloziert. Verwandte Referenzen: PMID:11101887 PMID:11336669 PMID:12456682 PMID:17157249 PMID:21976670
• Nach der Frachttransloziation wird PEX5 in einem Prozess, der zur Freisetzung der gebundenen Fracht in der peroxisomalen Matrix führt, retrotransloziert in das Zytosol, wodurch der Rezeptor für nachfolgende Importzyklen zurückgesetzt wird. Verwandte Referenzen: PMID:11336669 PMID:24662292
• Zusätzlich zu PTS1-Fracht vermittelt PEX5 den peroxisomalen Import von Proteinen, die ein C-terminales PTS2-Typ-Targeting-Signal enthalten, indem es an den PEX7-Rezeptor bindet, wenn dieser mit PTS2-Frachtproteinen assoziiert ist, und so den PTS2-Fracht-PEX7-Komplex mit der peroxisomalen Docking-Maschinerie verbrückt. Verwandte Referenzen: PMID:11336669 PMID:11546814 PMID:25538232
• PEX5 lokalisiert sich unter steady-state-Bedingungen vorwiegend im Zytoplasma und Zytosol, wandert aber während der Frachtzustellung transient in die peroxisomale Matrix.
• PEX5 ist weit verbreitet exprimiert und wurde in Geweben einschließlich Herz, Gehirn, Plazenta, Lunge, Leber, Skelettmuskel, Niere und Bauchspeicheldrüse nachgewiesen.
• Posttranslationale Modifikationen von PEX5 umfassen Phosphorylierung, Isopeptidbindungsbildung und ubiquitinähnliche Konjugation, die seinen Importzyklus und seine Stabilität regulieren können.
• Mutationen in PEX5 sind mit Störungen der Peroxisomen-Biogenese assoziiert, einschließlich des Zellweger-Syndroms und der rhizomelen chondrodysplasia punctata Typ 5 (RCDP5), was seine wesentliche Rolle für die Peroxisomenfunktion unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen umfasst die Aminosäuren 364-631 von humanem PEX5 und deckt die C-terminale TPR-Wiederholungsregion ab, die an Protein-Protein-Interaktionen beteiligt ist; berücksichtigen Sie diesen Zielbereich bei der Beurteilung der Antikörperspezifität oder der Gestaltung von Blockierungsexperimenten.
• Für die Western-Blot-Analyse wird ein dominantes Band bei ca. 71 kDa erwartet; validieren Sie die Antikörperleistung mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen und erwägen Sie eine subzelluläre Fraktionierung, um peroxisomale oder zytosolische Fraktionen anzureichern, angesichts der dualen Lokalisierung von PEX5.
• Dieser Antikörper wurde für Anwendungen der Immun-Immunzytochemie/Immunfluoreszenz (IF/ICC) und ELISA validiert; optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für IF, um peroxisomale Strukturen im relevanten Zelltyp zu erhalten.
• Die berichtete Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-PEX5 ermöglicht die Verwendung des Antikörpers über diese Spezies hinweg; jedoch sollte eine Sequenzausrichtung überprüft und eine Validierung im spezifischen experimentellen Modell empfohlen werden.
• Für Funktionsstudien kann die Kombination dieses Antikörpers mit Markern für Peroxisomen oder anderen Importkomponenten Einblicke in die Dynamik der Peroxisomen-Biogenese geben.

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