Anti-Perforin Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P14222

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Perforin-1

• Perforin-1 (PRF1) ist ein porenbildendes Protein, das für den Granzym-vermittelten Weg des programmierten Zelltods entscheidend ist und virusinfizierte sowie neoplastische Zellen zielt. Verwandte Referenzen: PMID:20889983 PMID:21037563 PMID:24558045
• Nach Calciumbindung lagert sich Perforin in die Membranen der Zielzellen ein, oligomerisiert und bildet große Poren, was den Eintritt von zytotoxischen Granzymen ermöglicht, die die Apoptose auslösen. Verwandte Referenzen: PMID:20889983 PMID:21037563 PMID:24558045 PMID:20038786 PMID:20225066
• Es bevorzugt die Lieferung kationischer Proteine, wie Granzyme, während neutrale oder anionische Proteine ineffizient durch seine Poren transloziert werden. Verwandte Referenzen: PMID:24558045
• Perforin spielt auch eine Schlüsselrolle bei der Immunüberwachung und trägt zum Abtöten von nicht-eigenen Zellen während der Transplantatabstoßung und bei Autoimmunerkrankungen bei. Verwandte Referenzen: PMID:9058810
• Perforinporen vermitteln die extrazelluläre Freisetzung von reifem Caspase-7 (CASP7) und verstärken so den programmierten Zelltod weiter.
• Subzellulär wird Perforin in zytolytischen Granula von zytotoxischen T-Lymphozyten und NK-Zellen gespeichert, nach Zielbindung sezerniert und kann an die Zellmembran und das Endosomenlumen lokalisiert werden.
• Das Protein enthält eine EGF-ähnliche Domäne, ist N-glykosyliert und benötigt Calcium für seine Aktivität; Mutationen im PRF1-Gen sind mit der familiären hämophagozytischen Lymphohistiozytose (FHL) verbunden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 280-555 von humanem Perforin und umfasst die Membranangriffskomplex/Perforin (MACPF)-Domäne, was darauf hindeutet, dass sowohl die Volllänge als auch potenzielle Spaltprodukte nachgewiesen werden.
• Für das Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 61 kDa; jedoch können posttranslationale Modifikationen wie Glykosylierung die Wanderung verändern. Validieren Sie die Bandengröße im relevanten Probensystem.
• Immunhistochemie und Immunfluoreszenz können eine Optimierung der Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen erfordern, um Epitope in zytolytischen Granula freizulegen.
• Dieser Antikörper zeigt eine breite Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte, was ihn für Studien über verschiedene Spezies hinweg geeignet macht; bestätigen Sie jedoch die Reaktivität in Ihrem Modellsystem.

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