Anti-PER2 Poliklonale Antikörper für WB, IHC-P, ELISA, ChIP - O15055

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PER2

• PER2 ist ein transkriptioneller Repressor und Kernkomponente der zirkadianen Uhr, die ungefähr 24-stündige Rhythmen der Genexpression erzeugen, die Stoffwechsel, Schlaf, Körpertemperatur und Immunfunktion regulieren.
• Es wirkt im Transkriptions-/Translations-Rückkopplungskreislauf (TTFL) durch Bildung eines negativen Schenkels: Zusammen mit CRY1/2 hemmt es die Aktivität des CLOCK/NPAS2-BMAL1/BMAL2-Heterodimers und unterdrückt seine eigene Expression.
• PER2 rekrutiert zudem chromatinmodifizierende Komplexe (SIN3-HDAC, H3K9-Methyltransferasen) an Promotoren und Terminationsstellen von Zielgenen und reguliert so Transkriptionsinitiation und -elongation.
• Subzellulär lokalisiert sich PER2 im Zellkern, Zytoplasma, perinukleären Bereich und Nukleolus und shuttlelt als Teil der Uhrenregulation zwischen diesen Kompartimenten.
• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung justieren die Stabilität von PER2 und die Länge der zirkadianen Periode.
• Weit verbreitet exprimiert mit höchsten Gehalten in Skelettmuskulatur und Bauchspeicheldrüse; Isoform 2 wurde in Keratinozyten nachgewiesen. Mutationen in PER2 verursachen das familiäre fortgeschrittene Schlafphasesyndrom (FASPS).
• PER2 ist an der metabolischen Regulation beteiligt, wirkt als Koaktivator von PPARA und Korepressor von NR1D1 und beeinflusst so den Lipidstoffwechsel und den Insulinspiegel.
• Es erhält zudem die kardiovaskuläre Funktion durch Regulation der NO- und Prostaglandinproduktion und steuert die zirkadiane Glutamataufnahme an Synapsen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 390–565 des humanen PER2 ab; aufgrund der Sequenzkonservierung kann es wie angegeben mit Maus- und Ratten-PER2 kreuzreagieren. Validieren Sie die Kreuzreaktivität in Ihrer Zielspezies.
• Für das Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 137 kDa. Verwenden Sie ein niedrigprozentiges Acrylamidgel und optimieren Sie die Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) testen Sie gegebenenfalls verschiedene Antigen-Retrieval-Methoden und bestätigen Sie die Färbespezifität in Geweben mit bekannter Expression wie Skelettmuskulatur oder Bauchspeicheldrüse.
• Für die Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP) fügen Sie geeignete Kontrollen hinzu (z. B. Knockout-Zelllinien oder Peptid-Konkurrenz), um die Antikörperspezifität und Zielanreicherung zu überprüfen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz dienen; die Paarung mit einem PER2-spezifischen monoklonalen Antikörper kann die Sensitivität und Spezifität des Assays verbessern.

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