Anti-PDXK-Polyklonalantikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O00764

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PDXK-Funktion und Lokalisierung

• PDXK (Pyridoxalkinase), auch bekannt als Pyridoxinkinase, ist ein Schlüsselenzym im Vitamin-B6-Salvage-Weg und gehört zur Familie der Pyridoxalkinasen.
• Katalysiert die ATP-abhängige Phosphorylierung von Vitamin-B6-Vitameren aus der Nahrung (Pyridoxal, Pyridoxin, Pyridoxamin) zu ihren jeweiligen 5'-Phosphaten und erzeugt so den aktiven Cofaktor Pyridoxal-5'-phosphat (PLP). Verwandte Referenzen: PMID:10987144 PMID:17766369 PMID:19351586
• Das PDXK-Gen befindet sich auf Chromosom 21 und wird ubiquitär exprimiert, wobei die höchsten Spiegel in Hoden und Spermatozoen nachgewiesen wurden. Verwandte Referenzen: PMID:31187503 PMID:9099727
• Subzellulär lokalisiert PDXK überwiegend im Zytoplasma und Zytosol, was zu seiner Rolle im Vitamin-B6-Stoffwechsel passt.
• Die PDXK-Aktivität ist von zweiwertigen Metallionen wie Magnesium, Mangan, Zink und Kobalt abhängig, was durch seine Metallbindungseigenschaften angezeigt wird.
• Mutationen in PDXK sind mit der Charcot-Marie-Tooth-Krankheit Typ 6C (CMT6C) und anderen Formen von Neuropathie assoziiert, was seine Rolle für die neuronale Gesundheit unterstreicht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, wie durch Proteomik-Ansätze identifiziert wurde.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Transkriptvarianten, die möglicherweise die Enzymaktivität oder Lokalisierung modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da dieser polyklonale Antikörper gegen das vollständige rekombinante humane PDXK hergestellt wurde, kann er mehrere Epitope erkennen und könnte in Anwendungen wie Western Blot eine höhere Sensitivität aufweisen, aber potenzielle Kreuzreaktivität mit anderen Spezies oder Isoformen sollte berücksichtigt werden.
• Für Western Blot (WB) unter reduzierenden Bedingungen beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von PDXK ~35 kDa; die Validierung sollte jedoch mit geeigneten positiven Kontrollen wie humanen, murinen oder ratten-Zelllysaten, von denen bekannt ist, dass sie PDXK exprimieren, erfolgen.
• Für Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, um die zytoplasmatische Lokalisierung des Targets zu erhalten; eine negative Kontrolle (ohne Primärantikörper) sollte zur Bewertung des Hintergrunds eingeschlossen werden.
• Bei der Verwendung von ELISA sollte ein passender Capture- oder Detektionsantikörper gepaart werden, und die Spezifität sollte, falls verfügbar, mit rekombinantem PDXK-Protein bestätigt werden.
• Angesichts der breiten Speziesreaktivität des Antikörpers (human, Maus, Ratte) ist er für artübergreifende Studien geeignet; dennoch sollte die Reaktivität in Ihrem spezifischen Modellsystem vor groß angelegten Experimenten bestätigt werden.

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