Anti-PDK3 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q15120

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PDK3-Funktion und -Lokalisierung

• PDK3 kodiert für eine mitochondriale Pyruvatdehydrogenase-Kinase, die den Pyruvatdehydrogenase-Komplex durch Phosphorylierung der E1-alpha-Untereinheiten PDHA1 und PDHA2 hemmt und so den Eintritt von Pyruvat in den Tricarbonsäurezyklus steuert.
• Diese Kinase fungiert als kritischer metabolischer Schalter, reduziert die Glukoseverwertung und fördert die Fettsäureoxidation als Reaktion auf langes Fasten oder eine fettreiche Ernährung, was zur Aufrechterhaltung der Glukosehomöostase beiträgt.
• PDK3 ist eine von vier PDK-Isoformen (PDK1-4), die den Pyruvatdehydrogenase-Komplex in verschiedenen Geweben und Stoffwechselzuständen unterschiedlich regulieren.
• Das PDK3-Präprotein wird zur mitochondrialen Matrix transportiert, wo es seine regulatorische Funktion auf den Pyruvatdehydrogenase-Komplex ausübt.
• PDK3 ist eine ATP-bindende Kinase, die zur Transferase-Familie gehört; sie kann auch zur Erzeugung reaktiver Sauerstoffspezies beitragen.
• Die Gewebeexpression ist besonders hoch in Herz, Skelettmuskel, Rückenmark sowie fetalem und adultem Gehirn, was mit ihrer Rolle bei der Modulation des Stoffwechsels in hoch oxidativen Geweben übereinstimmt.
• Pathogene Varianten in PDK3 sind mit der Charcot-Marie-Tooth-Krankheit, einer peripheren Neuropathie, assoziiert, was ihre Bedeutung für die neuronale Funktion unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 137-406 des humanen PDK3 und deckt einen wesentlichen Teil der Kinasedomäne ab; dieses Design kann sowohl die Vollform als auch mögliche alternativ gespleißte Isoformen erkennen.
• Für Western Blot sollten Proteinlysate aus Geweben mit hoher PDK3-Expression wie Herz, Skelettmuskel oder Gehirn verwendet werden; optimieren Sie die Antikörperverdünnung basierend auf Vorversuchen.
• Bei ELISA sollten direkte oder indirekte Protokolle mit rekombinantem PDK3-Protein oder Zelllysaten evaluiert werden, um die Bindungsspezifität zu bestätigen.
• Angesichts des vorhergesagten Molekulargewichts von ~47 kDa ist eine ausreichende Gelelektrophorese sicherzustellen und die Bandenidentität mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen zu verifizieren.
• Es wird über Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-PDK3 berichtet; validieren Sie diese im relevanten Probensystem, wenn artenübergreifend gearbeitet wird.

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