Anti-PDIA6 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q15084

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PDIA6-Funktion und -Lokalisierung

• PDIA6 (Proteindisulfid-Isomerase A6), auch als ERP5, P5 oder TXNDC7 bezeichnet, gehört zur Familie der Proteindisulfid-Isomerasen und enthält Thioredoxin-Domänen.
• Fungiert als molekularer Chaperon, der die Aggregation fehlgefalteter Proteine hemmt und zur Proteostase im endoplasmatischen Retikulum beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:12204115
• Reguliert die Reaktion auf fehlgefaltete Proteine (UPR) negativ durch Bindung an UPR-Sensoren wie ERN1 (IRE1α) und EIF2AK3 (PERK), wodurch ihre nachgeschalteten Signalkaskaden abgeschwächt werden. Verwandte Referenzen: PMID:24508390
• Spielt eine Rolle bei der Thrombozytenaggregation und -aktivierung nach Stimulation durch Agonisten einschließlich Convulxin, Kollagen und Thrombin. Verwandte Referenzen: PMID:15466936
• Lokalisiert sich vorwiegend im Lumen des endoplasmatischen Retikulums, wird aber auch an der Zellmembran und in Melanosomen nachgewiesen, was auf diverse funktionelle Nischen hindeutet.
• Wird auf Proteinebene in Thrombozyten exprimiert; posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Disulfidbrückenbildung, was auf eine regulatorische Redoxaktivität hindeutet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Die Immunogen-Sequenz (Aminosäuren 1-100 von menschlichem PDIA6) entspricht der N-terminalen Region; sie kann für die Detektion des全长-Proteins in denaturierenden Western Blots geeignet sein. Für native Anwendungen wie IF/ICC sollte die Zugänglichkeit des Epitops überprüft werden.
• Im Western Blott ist ein Band nahe 48 kDa zu erwarten; validieren Sie die Detektion in Zelllinien wie HEK293 oder Thrombozyten-Lysaten.
• Für die Immunfluoreszenz zeigt PDIA6 ein retikuläres ER-Färbemuster; eine Kollokalisierung mit einem ER-Marker wird empfohlen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Die angegebene Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte sollte im entsprechenden Gewebe überprüft werden, da Sequenzvariationen in der Immunogen-Region die Bindung beeinträchtigen könnten.
• Für ELISA kann in Betracht gezogen werden, diesen Antikörper nach Titration und Validierung mit rekombinantem PDIA6 als Capture- oder Detektionsreagenz zu verwenden.
• Um die Rolle von PDIA6 im UPR zu untersuchen, kann die Induktion von ER-Stress (z. B. mit Tunicamycin) dessen Expression modulieren.
• Verwenden Sie reduzierende Bedingungen für die Elektrophorese, um intramolekulare Disulfidbrücken zu berücksichtigen und das erwartete Molekulargewicht zu erreichen.

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