Anti-PDGFB-Polyklonalantikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P01127

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PDGFB-Funktion und -Lokalisierung

• PDGFB, auch bekannt als PDGF-2, platelet-derived growth factor B chain, beta polypeptide und Proto-Onkogen c-Sis, ist ein sekretierter Wachstumsfaktor, der vom PDGFB-Gen kodiert wird (Synonyme: PDGF2, SIS).
• Es fungiert als potenter Mitogen für mesenchymale Zellen und treibt Zellproliferation, Migration, Überleben und Chemotaxis während der Embryonalentwicklung und Gewebehomöostase an. Verwandte Referenzen: PMID:26599395
• PDGFB ist essentiell für die normale Gefäßentwicklung: Es wird für die Proliferation und Rekrutierung von Perizyten und vaskulären glatten Muskelzellen im Zentralnervensystem, in der Haut, Lunge, im Herzen und in der Plazenta sowie für die Bildung von Blutgefäßen und Nierenglomeruli benötigt.
• Es spielt eine kritische Rolle bei der Wundheilung, wo es die Chemotaxis und Proliferation von Fibroblasten und glatten Muskelzellen stimuliert.
• Die PDGFB-Signalgebung wird durch die Bildung von Heterodimeren mit PDGFA (platelet-derived growth factor subunit A) moduliert, was die Rezeptorbindung und nachgeschaltete Effekte verändert.
• Das Protein wird sezerniert und enthält charakteristische Disulfidbindungen und Glykosylierungen, die zu seiner Stabilität und Dimerisierung beitragen.
• Die Gewebeexpression ist am höchsten im Herzen, in der Substantia nigra des Gehirns, in der Plazenta und in der fetalen Niere, mit moderaten Werten im Hippocampus, Skelettmuskel, adulten Nieren und Lungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 140–241 von humanem PDGFB umfasst, das sowohl die Vorläufer- als auch die reifen Formen des Proteins erkennen sollte.
• Für Western Blot (WB) wird unter reduzierenden Bedingungen ein Band von etwa 27 kDa erwartet. Unter nicht-reduzierenden Bedingungen können dimerische Formen aufgrund von interkettigen Disulfidbindungen bei höheren Molekulargewichten erscheinen; ziehen Sie einen Vergleich von reduzierenden vs. nicht-reduzierenden Bedingungen in Betracht, um monomere und dimere Populationen zu unterscheiden.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) wird aufgrund der sekretorischen Natur von PDGFB eine Antigen-Retrieval (z.B. hitzevermittelter Citratpuffer) empfohlen; für den intrazellulären Nachweis ist eine Permeabilisierung erforderlich.
• Für ELISA verwenden Sie ein Beschichtungsantigen, das der Immunogenregion oder rekombinantem PDGFB-Protein entspricht; führen Sie eine Standardkurve durch, um die optimalen Konzentrationen für Fänger- und Detektionsantikörper zu bestimmen.
• Es wird eine Kreuzreaktivität mit Human und Ratte berichtet; validieren Sie bei Bedarf in Maus oder anderen Spezies, da die Sequenzhomologie variieren kann.
• Schließen Sie immer geeignete positive und negative Kontrollen ein (z.B. PDGFB-überexprimierender Zelllysat vs. Knockout oder Gewebe, von dem bekannt ist, dass es keine Expression aufweist), um die Spezifität zu bestätigen.

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