Anti-PDE8A-Kaninchen-Polyklonalantikörper für WB, ELISA – O60658

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PDE8A

• PDE8A ist eine hochaffine, cAMP-spezifische und IBMX-unempfindliche 3',5'-zyklische Phosphodiesterase, auch bekannt als HsT19550, mit mehreren durch alternatives Spleißen erzeugten Isoformen (UniProt-Schlüsselwörter: alternatives Spleißen).
• Das Enzym hydrolysiert den sekundären Botenstoff cAMP und spielt eine Schlüsselrolle bei der Regulation zahlreicher physiologischer Prozesse sowie bei der Aufrechterhaltung der basalen cAMP-Spiegel; insbesondere ist es an der cAMP-Regulation während der Entwicklung von Keimzellen beteiligt (PubMed:18983167). Zugehörige Referenzen: PMID:18983167
• PDE8A bindet an RAF1 und reduziert dessen inhibitorische Phosphorylierung an Ser-259, wodurch die RAF1-abhängige, durch EGF aktivierte ERK-Signalübertragung stimuliert wird (PubMed:23509299). Zugehörige Referenzen: PMID:23509299
• Diese Phosphodiesterase schützt vor durch Wasserstoffperoxid und Staurosporin induziertem Zelltod und unterstreicht damit ihre Rolle in zellulären Überlebenswegen (PubMed:23509299). Zugehörige Referenzen: PMID:23509299
• Die Analyse der Gewebeexpression zeigt, dass PDE8A weit verbreitet ist, wobei die höchsten Konzentrationen in Hoden, Eierstock, Dünndarm und Kolon vorkommen; in Thymus und peripheren Blutleukozyten fehlt es.
• UniProt annotiert es als metallbindendes Phosphoprotein mit bekannter 3D-Struktur, was seine funktionelle Charakterisierung unterstützt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1–120 am N-Terminus des humanen PDE8A; daher ist zu erwarten, dass der Antikörper Epitope innerhalb dieser Region erkennt und möglicherweise alle Isoformen nachweist, die diese Sequenz enthalten.
• Für Western Blotting (WB) empfiehlt sich die Verwendung einer Verdünnungsreihe zur Bestimmung der optimalen Arbeitskonzentration; das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt etwa 93 kDa, jedoch können posttranslationale Modifikationen oder Isoformvarianten zu einer Verschiebung der Bande führen.
• Für ELISA-Anwendungen sollte der Antikörper gegen rekombinantes oder natives Protein in der relevanten Probenmatrix validiert werden; eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde festgestellt, daher sollten diese Spezies für Speziesübergreifende Studien in Betracht gezogen werden.
• Wie bei jedem polyklonalen Antikörper sollte die Chargenkonsistenz unabhängig überprüft werden. Zur Bestätigung des spezifischen Signals werden geeignete Negativkontrollen empfohlen.

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