Anti-PDE4A-Polyklonalantikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27815

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PDE4A-Funktion und Lokalisierung

• PDE4A, auch bekannt als cAMP-spezifische Phosphodiesterase 4A, ist ein Mitglied der Phosphodiesterase-4-Familie, die spezifisch den Second Messenger 3',5'-zyklisches AMP (cAMP) zu AMP hydrolysiert und dadurch cAMP-Signalwege herunterreguliert.
• Das Enzym spielt eine entscheidende Rolle in der Zellsignalübertragung, indem es die intrazellulären cAMP-Konzentrationen kontrolliert und Prozesse wie Entzündung, glatte Muskelkontraktion und kognitive Funktion beeinflusst.
• PDE4A zeichnet sich durch seine Unabhängigkeit von Kalzium, Calmodulin und cGMP-Spiegeln aus; es hydrolysiert kein cGMP, was es von anderen Phosphodiesterasen unterscheidet.
• Das Gen unterliegt alternativem Spleißen, wodurch mehrere Isoformen mit unterschiedlichen regulatorischen Eigenschaften und Gewebeverteilungen entstehen.
• Subzellulär lokalisiert PDE4A im Zytoplasma, perinukleären Bereich, Zytosol, an Membranen und Zellfortsätzen wie Riffelmembranen, was auf eine Beteiligung an kompartimentierter cAMP-Signalgebung hindeutet.
• Es wird stark exprimiert in Organen wie Leber, Magen, Hoden, Schilddrüse, Nebennieren, Herz und Dünndarm sowie in verschiedenen Immunzell-Subsets wie T-Zellen, dendritischen Zellen, Makrophagen und Mastzellen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Ubiquitinierung und Isopeptidbindungsbildung, wobei das Protein Mangan- und Zinkionen als Cofaktoren bindet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Die Immunogen-Sequenz (Aminosäuren 325-410) entspricht einer Region innerhalb der katalytischen Domäne; überprüfen Sie die Antikörperspezifität gegenüber gewünschten Isoformen mittels WB mit rekombinanten Proteinen oder Zelllysaten relevanter Spezies.
• Für WB ist eine Bande um 98 kDa zu erwarten; ziehen Sie die Verwendung von Positivkontroll-Lysaten aus Geweben mit hoher PDE4A-Expression (z.B. Leber, Herz) oder aus stimulierten Immunzellen in Betracht.
• Führen Sie bei IHC-P und IF/ICC sowohl negative als auch positive Gewebekontrollen (z.B. humane oder Nagetiergewebe mit bekannten Expressionsmustern) durch und optimieren Sie die Antigen-Retrieval-Bedingungen.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise eine sorgfältige Titration, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erreichen; die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte unterstützt Multi-Spezies-Assays, validieren Sie dies jedoch stets in Ihrem spezifischen experimentellen System.

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