Anti-PD-L1/CD274 polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q9NZQ7

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PD-L1

• PD-L1 (Programmed cell death 1 ligand 1), auch als B7-H1 oder CD274 bezeichnet, ist ein Transmembranprotein vom Typ I, das zur Immunglobulin-Superfamilie gehört. Es enthält eine Ig-ähnliche V-Domäne und eine Ig-ähnliche C2-Domäne und unterliegt alternativem Spleißen sowie Glykosylierung.
• Als Ligand für den inhibitorischen Rezeptor PDCD1/PD-1 spielt PD-L1 eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung der peripheren Immuntoleranz, der Modulation der Aktivierungsschwelle von T-Zellen und der Begrenzung von T-Zell-Effektorantworten. Verwandte Referenzen: PMID:11015443 PMID:28813410 PMID:28813417
• Der durch PDCD1 vermittelte inhibitorische Signalweg wird von Tumoren genutzt, um die Antitumorimmunität zu unterdrücken und dadurch eine Immunflucht zu ermöglichen. Die Blockade der PD-L1/PD-1-Interaktion kann die T-Zell-Erschöpfung umkehren und Antitumorreaktionen wiederherstellen, was ihre Bedeutung in der Krebsimmuntherapie begründet. Verwandte Referenzen: PMID:28813410 PMID:28813417
• PD-L1 kann außerdem T-Zell-Subpopulationen kostimulieren, die überwiegend Interleukin-10 (IL-10) über einen bislang unbekannten aktivierenden Rezeptor produzieren. Verwandte Referenzen: PMID:10581077
• Als Reaktion auf Hypoxie kann PD-L1 durch eine Interaktion mit phosphoryliertem STAT3 in den Zellkern translozieren, wo es als Transkriptionskoaktivator die GSDMC-Transkription fördert und Pyroptose induziert. Verwandte Referenzen: PMID:32929201
• Auf subzellulärer Ebene ist PD-L1 hauptsächlich auf der Zellmembran lokalisiert, kommt jedoch auch auf frühen und recycelnden Endosomen sowie im Zellkern vor und kann sezerniert werden.
• Die Gewebeexpression ist breit gefächert; PD-L1 wird im Herzen, in der Skelettmuskulatur, in der Plazenta und in der Lunge stark exprimiert, mit einer moderaten Expression in Immunzellen, einschließlich aktivierter T- und B-Zellen, dendritischer Zellen und Monozyten.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäurereste 19–238 der extrazellulären Domäne) zielt auf eine Region ab, die auf nativem PD-L1 wahrscheinlich zugänglich ist. Dadurch eignet sich dieser Antikörper zum Nachweis sowohl membrangebundener als auch löslicher Formen. Für den Western Blot sollten reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen und eine geeignete Proteinmenge aufgetragen werden; es wird eine Bande bei etwa 33 kDa erwartet.
• Bei IHC-P kann eine Antigenretrieval-Behandlung (hitzebedingt in Citratpuffer, pH 6,0) den Nachweis verbessern; titrieren Sie den Antikörper, um die spezifische Färbung zu optimieren. Validieren Sie den Antikörper in bekannten positiven Geweben wie Plazenta- oder Tumorproben.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte kann dieser Antikörper für Spezies übergreifende Studien eingesetzt werden. Überprüfen Sie in solchen Fällen die Signalspezifität mithilfe geeigneter Kontrollen (z. B. Knockout-Gewebe).
• Da PD-L1 häufig glykosyliert ist und in einigen Systemen als Schmierband oder in Form mehrerer Banden erscheinen kann, werden für WB denaturierende und reduzierende Bedingungen empfohlen.

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