Anti-PCSK9 Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q80W65

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PCSK9

• Proproteinkonvertase Subtilisin/Kexin Typ 9 (PCSK9), auch bekannt als NARC-1 oder PC9, ist eine sezernierte Serinprotease, die zur Familie der Proproteinkonvertasen gehört. Sie wird als Zymogen synthetisiert und unterläuft im Endoplasmatischen Retikulum eine autokatalytische Spaltung.
• PCSK9 ist ein entscheidender Regulator der Plasmacholesterin-Homöostase: Es bindet an Mitglieder der Low-Density-Lipoprotein(LDL)-Rezeptorfamilie (LDLR, VLDLR, LRP1, LRP8) und fördert deren intrazellulären Abbau, wodurch die LDL-Cholesterinaufnahme reduziert wird.
• Es verstärkt den hepatischen LDLR-Abbau über einen Clathrin-abhängigen Weg, wahrscheinlich indem es die Rekylierung von LDLR von Endosomen zur Zelloberfläche verhindert oder ihn zu Lysosomen leitet, und kann zudem die LDLR-Ubiquitinierung induzieren.
• Neben LDLR hemmt PCSK9 den intrazellulären Abbau von Apolipoprotein B (APOB) über einen LDLR-unabhängigen Autophagosom/Lysosom-Weg und beteiligt sich an der Beseitigung nicht-acylierter BACE1-Zwischenprodukte im frühen Sekretionsweg.
• PCSK9 moduliert die durch den epithelialen Natriumkanal (ENaC) vermittelte Na+-Absorption, indem es die Oberflächenexpression durch verstärkten proteasomalen Abbau verringert, und reguliert die neuronale Apoptose über LRP8/APOER2-abhängige anti-apoptotische Signalgebung.
• Subzellulär lokalisiert sich PCSK9 im Zytoplasma, wird sezerniert und assoziiert mit Endosomen, Lysosomen, der Zelloberfläche, dem Endoplasmatischen Retikulum und dem Golgi-Apparat – was seine Transport- und Funktionsvielfalt widerspiegelt.
• Die Gewebeexpression ist besonders ausgeprägt in Hepatozyten, mesenchymalen Nierenzellen, Epithelien des Ileums und Kolons sowie Neuronen des Telenzephalons im embryonalen Gehirn.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 35–694 von Maus-PCSK9 ab und umfasst die katalytische Domäne sowie die C-terminale Region; der Antikörper kann sowohl die volllängige Pro-Form (~74 kDa) als auch die reife gespaltene Form erkennen. Erwägen Sie die Validierung detektierter Banden mit geeigneten Kontrollen.
• Verwenden Sie für Western Blot eine reduzierende SDS-PAGE und erwarten Sie eine Hauptbande nahe 74 kDa in Mausleber- oder Hepatozytenlysaten; der Antikörper kreuzreagiert mit Mensch und Ratte, bestätigen Sie aber die Reaktivität bei Ihrer Zielart.
• In IF/ICC-Experimenten zeigt PCSK9 eine punktierte zytoplasmatische und perinukleäre Verteilung, die mit ER-, Golgi- und endosomalen Kompartimenten übereinstimmt. Permeabilisierung ist erforderlich; optimieren Sie Fixierung und Antikörperverdünnung für Ihren Zelltyp.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz zur Messung von PCSK9 in Zellüberständen oder biologischen Flüssigkeiten verwendet werden. Validieren Sie die Assaybedingungen mit rekombinanten PCSK9-Standards.

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