Anti-PCSK9 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q8NBP7

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PCSK9

• PCSK9 (Proprotein-Konvertase Subtilisin/Kexin Typ 9) ist ein wichtiger Regulator der Plasma-Cholesterinhomöostase, der durch Bindung an Mitglieder der LDL-Rezeptorfamilie (LDLR, VLDLR, LRP1, LRP8) deren Abbau in intrazellulären sauren Kompartimenten fördert. Zugehörige Referenzen: PMID:18039658

• Es wirkt über einen nicht-proteolytischen Mechanismus, um den hepatischen LDLR-Abbau über einen durch Clathrin/LDLRAP1 vermittelten Weg zu verstärken, wodurch möglicherweise das Recycling von LDLR verhindert oder LDLR zu Lysosomen geleitet wird. Zugehörige Referenzen: PMID:17461796, PMID:18197702, PMID:18799458

• PCSK9 hemmt außerdem den intrazellulären APOB-Abbau über den Autophagosom/Lysosom-Weg unabhängig von LDLR und ist am Abbau von BACE1 im frühen sekretorischen Weg beteiligt. Zugehörige Referenz: PMID:18660751

• Das Protein ist in mehreren subzellulären Kompartimenten lokalisiert, darunter Zytoplasma, extrazellulärer Raum, Endosomen, Lysosomen, Zelloberfläche, endoplasmatisches Retikulum und Golgi-Apparat, was seinen dynamischen Transport widerspiegelt.

• Als Mitglied der Familie der Subtilisin/Kexin-Serinproteasen unterliegt PCSK9 einer autokatalytischen Spaltung zwischen der Prodomäne und der katalytischen Domäne und weist posttranslationale Modifikationen wie Glykosylierung, Phosphorylierung, Sulfatierung und Disulfidbrückenbildung auf.

• Zusätzlich zum Cholesterinstoffwechsel reguliert PCSK9 die neuronale Apoptose durch Modulation der LRP8/APOER2-Spiegel und der damit verbundenen antiapoptotischen Signalübertragung und hemmt die ENaC-vermittelte Na+-Absorption.

• Eine Gewebeexpression wurde in Neuroepitheliomen, Kolonkarzinomen, hepatischen und pankreatischen Zelllinien sowie Schwann-Zellen beobachtet, was mit seinen Funktionen im Lipid- und Steroidstoffwechsel übereinstimmt.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 31-692 des humanen PCSK9 einschließlich der katalytischen Domäne und der C-terminalen Region; diese breite Region kann zu einer robusten Reaktivität führen. Führen Sie eine Titration und Validierung in Ihrem relevanten Probensystem durch.

• Beachten Sie beim Western-Blot, dass PCSK9 als Volllängenprotein von etwa 74 kDa und als Fragment von etwa 20 kDa nachgewiesen werden kann, das wahrscheinlich der abgespaltenen Prodomäne entspricht. Abhängig von der Probenvorbereitung und der endogenen Spaltung können zusätzliche Banden auftreten. Bestätigen Sie die Bandenmuster mit geeigneten Kontrollen.

• Wählen Sie für Immunfluoreszenz und Immunpräzipitation eine mit Ihrem Protokoll und Zelltyp kompatible Antikörperverdünnung; schließen Sie positive und negative Kontrollen ein, um die Spezifität zu beurteilen.

• Laut Angaben des Lieferanten reagiert dieser Antikörper mit humanem und Ratten-PCSK9. Überprüfen Sie beim Testen anderer Spezies die Sequenzhomologie und führen Sie eine empirische Validierung der Kreuzreaktivität durch.

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