Polyklonaler Anti-PCSK1-Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P29120

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PCSK1

• Die neuroendokrine Konvertase 1, auch als Prohormonkonvertase 1 (PC1) oder Proprotein-Konvertase 1 bekannt, wird vom PCSK1-Gen kodiert und gehört zur Familie der subtilisin-/kexinähnlichen Proprotein-Konvertasen. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Sie fungiert als calciumabhängige Serin-Endoprotease, die Vorläuferproteine spezifisch an Stellen spaltet, die aus Paaren basischer Aminosäuren bestehen (z. B. Lys-Arg, Arg-Arg), einem entscheidenden Schritt bei der Reifung zahlreicher Prohormone und Neuropeptide.
• Zu den wichtigsten Substraten gehören Proopiomelanocortin (POMC), Proinsulin, Proglukagon, Prorenin, Proenkephalin, Prodynorphin und Proagouti-verwandtes Protein (AGRP), wodurch Energiehomöostase, Stressreaktion und neuroendokrine Signalübertragung reguliert werden.
• Auf subzellulärer Ebene ist PCSK1 in sekretorischen Vesikeln lokalisiert, einschließlich der Dense-Core-Granula des regulierten sekretorischen Weges in neuroendokrinen Zellen und Neuronen.
• Das Protein wird als inaktives Zymogen mit einer N-terminalen Prodomäne synthetisiert, die bei der Aktivierung entfernt wird, und durchläuft autokatalytische Spaltung, N-Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, um die reife, aktive Protease zu bilden.
• Mit Krankheiten assoziierte Varianten in PCSK1 stehen mit Adipositas und Stoffwechselstörungen (z. B. BMIQ12) sowie mit schwerem Malabsorptionsdiarrhö und endokrinen Anomalien in Zusammenhang, was seine physiologische Bedeutung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht dem N-terminalen Abschnitt (AS 28–170) des humanen PCSK1, der einen Teil der Prodomäne und der katalytischen Domäne umfasst; der Antikörper kann sowohl den vollständigen Vorläufer (~84 kDa) als auch verarbeitete Formen erkennen.
• Für den Western Blot sollten Positivkontrollen aus humanem, murinem oder Rattengewebe neuroendokrinen Ursprungs (z. B. Hypophyse, Hypothalamus, Pankreasinseln) verwendet und die Proteinbeladung sowie die Bedingungen für die Membranblockierung optimiert werden.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC ist ein punktförmiges zytoplasmatisches Färbemuster zu erwarten, das mit der Lokalisation in sekretorischen Vesikeln übereinstimmt; die Permeabilisierung sollte ausreichend sein, um den Zugang des Antikörpers zu den intrazellulären Kompartimenten zu ermöglichen.
• Bei der Durchführung eines ELISA sollten die Kompatibilität des Antikörperpaars und Matrixeffekte in Ihrem Probentyp validiert werden; das rekombinante Immunogen kann als positive Referenzstandard verwendet werden.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte eignet sich dieser Antikörper für translationale Studien in Nagetiermodellen für Adipositas, Diabetes oder neuroendokrine Dysfunktion.

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