Anti-PCCB-Kaninchen-Monoklonaler Antikörper [KO-validiert] für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P05166

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PCCB (Propionyl-CoA-Carboxylase Beta-Kette) Funktion und Lokalisation

• Das PCCB-Gen kodiert für die Beta-Untereinheit der Propionyl-CoA-Carboxylase (PCC), ein mitochondriales biotinabhängiges Enzym; alternatives Spleißen führt zu mehreren Isoformen.
• PCC katalysiert die Carboxylierung von Propionyl-CoA zu D-Methylmalonyl-CoA, einen Schlüsselschritt im Katabolismus von Fettsäuren mit ungerader Kette und verzweigtkettigen Aminosäuren (Isoleucin, Threonin, Methionin, Valin). Verwandte Referenzen: PMID:15890657 PMID:6765947
• Innerhalb des Holoenzyms vermittelt die Alpha-Untereinheit die ATP-abhängige Biotin-Carboxylierung, während die Beta-Untereinheit die Carboxylgruppe von Biotin auf Propionyl-CoA überträgt (By similarity).
• Das Enzym zeigt auch Aktivität gegenüber Butyryl-CoA unter Bildung von Ethylmalonyl-CoA und kann Crotonoyl-CoA als alternatives Substrat umsetzen (By similarity). Verwandte Referenzen: PMID:6765947
• PCCB ist ausschließlich in der mitochondrialen Matrix lokalisiert.
• Das Protein unterliegt Acetylierung und Phosphorylierung und enthält ein mitochondriales Transitpeptid; Mutationen in PCCB sind mit Propionazidämie, einer autosomal-rezessiven Stoffwechselstörung, assoziiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde mit Knockout (KO)-Modellen validiert; schließen Sie geeignete positive und negative Kontrollen in Ihre Experimente ein, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für Western Blotting läuft das Zielprotein bei ~58 kDa; verwenden Sie ein 10% oder 12% SDS-PAGE-Gel und optimieren Sie die Transferbedingungen für mittelgroße Proteine.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) überprüfen Sie die Färbung in mitochondrienreichen Geweben oder Zelllinien mit bekannter PCCB-Expression, unter Verwendung mitochondrialer Marker als Kolokalisationsreferenzen.
• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 260–539 von humanem PCCB, was einer wahrscheinlich an Untereinheitenwechselwirkungen beteiligten Region entspricht; dies kann helfen, sowohl native als auch denaturierte Formen über alle Anwendungen hinweg zu detektieren.
• Beim Aufbau von ELISA-Assays sollten Sie einen breiten Verdünnungsbereich testen und rekombinantes PCCB-Protein als Standard verwenden, um optimale Arbeitskonzentrationen zu bestimmen.

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