Anti-PBEF/Visfatin/NAMPT-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P43490

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PBEF/Visfatin/NAMPT

• PBEF/Visfatin/NAMPT, auch als Nicotinamid-Phosphoribosyltransferase bekannt, ist ein 56-kDa-Protein, das als geschwindigkeitsbestimmendes Enzym in der NAD-Biosynthese von Säugetieren fungiert. Es katalysiert die Kondensation von Nicotinamid mit 5-Phosphoribosyl-1-pyrophosphat zur Bildung von Nicotinamidmononukleotid.
• Zusätzlich zu seiner enzymatischen Funktion wirkt die sezernierte Form von NAMPT als Zytokin (PBEF) mit immunmodulierenden Eigenschaften und als Adipokin (Visfatin) mit potenziellen antidiabetischen Effekten; dieser Form fehlt aufgrund der geringen ATP-Verfügbarkeit im Extrazellularraum die enzymatische Aktivität.
• NAMPT trägt zur Regulation der circadianen Uhr bei, indem es die oszillierende NAD-Produktion antreibt. Dadurch wird die Aktivität des CLOCK-BMAL1-Heterodimers über die durch SIRT1 vermittelte Deacetylierung moduliert, was die rhythmische Genexpression beeinflusst.
• Das Protein ist im Zellkern und im Zytoplasma lokalisiert und wird auch sezerniert; seine subzelluläre Verteilung steht im Einklang mit seinen bifunktionalen Aufgaben im Stoffwechsel und in der interzellulären Signalübertragung.
• NAMPT wird besonders stark im Knochenmark, in der Leber und in der Muskulatur exprimiert und ist zusätzlich in Herz, Plazenta, Lunge und Niere vorhanden, was seine vielfältigen metabolischen und immunologischen Funktionen widerspiegelt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung und Phosphorylierung, die seine enzymatische Aktivität, Stabilität oder Sekretion unter verschiedenen physiologischen Bedingungen regulieren können.
• Strukturell gehört NAMPT zur Familie der Glykosyltransferasen. Seine 3D-Struktur wurde aufgeklärt und liefert Einblicke in die Substratbindung und den katalytischen Mechanismus.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 300–400 des humanen NAMPT. Berücksichtigen Sie bei der Versuchsplanung die Zugänglichkeit des Epitops unter nativen und denaturierten Bedingungen.
• Für den Western Blot wird eine Bande bei etwa 56 kDa erwartet. Validieren Sie den Antikörper mit geeigneten Lysaten aus menschlichem, Maus- oder Rattengewebe und verwenden Sie positive und negative Kontrollen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für IHC-P können geeignete Methoden zur Antigenrückgewinnung erforderlich sein. Erwägen Sie Tests an Geweben mit bekannter hoher Expression, beispielsweise Leber oder Knochenmark, und schließen Sie Isotypkontrollen ein.
• Bei ELISA-Anwendungen könnte die Kombination dieses Antikörpers mit einem Detektionsreagenz, das auf ein nicht überlappendes Epitop abzielt, die Entwicklung eines Sandwich-Assays ermöglichen. Validieren Sie den Ansatz in relevanten Probenmatrices.

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