Polyklonaler Anti-PBEF/Visfatin/NAMPT-Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P43490

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PBEF/Visfatin/NAMPT

• PBEF/Visfatin/NAMPT, auch bekannt als Nicotinamid-Phosphoribosyltransferase, Pre-B-Zell-Kolonie-verstärkender Faktor 1 oder Visfatin, ist das geschwindigkeitsbestimmende Enzym der NAD-Biosynthese bei Säugetieren. Es katalysiert die Kondensation von Nicotinamid mit 5-Phosphoribosyl-1-pyrophosphat zu Nicotinamidmononukleotid.
• Das Protein liegt in mehreren Formen vor: intrazellulär als aktives Enzym und in einer sezernierten Form, die als Zytokin (immunmodulierend) und Adipokin (antidiabetisch) wirkt. Die sezernierte Form besitzt jedoch aufgrund der niedrigen extrazellulären ATP-Konzentration keine enzymatische Aktivität.
• Es spielt eine Schlüsselrolle bei der Regulation des zirkadianen Rhythmus durch die NAMPT-abhängige oszillatorische Produktion von NAD, die die transkriptionelle Aktivität von CLOCK-BMAL1 über eine NAD-abhängige, durch SIRT1 vermittelte Suppression moduliert.
• Das durch das NAMPT-Gen (auch als PBEF oder PBEF1 bekannt) kodierte Protein ist eine Glykosyltransferase, die an der Biosynthese von Pyridinnukleotiden beteiligt ist.
• Auf subzellulärer Ebene befindet sich NAMPT im Zellkern und im Zytoplasma und kann in den extrazellulären Raum sezerniert werden.
• Die Gewebeexpression ist im Knochenmark, in der Leber und in der Muskulatur besonders ausgeprägt; außerdem kommt das Protein im Herzen, in der Plazenta, in der Lunge und in der Niere vor.
• Das Protein durchläuft mehrere posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Funktion und Lokalisierung regulieren können.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 181-382 des humanen NAMPT, einer Region, die in verschiedenen Konformationen für die Antikörperbindung zugänglich sein kann. Berücksichtigen Sie je nach Anwendung die Unterschiede zwischen denaturierenden und nativen Bedingungen.
• Bei WB wird eine Bande bei etwa 56 kDa erwartet. Validieren Sie den Nachweis in Lysaten aus humanen, murinen oder Rattenproben.
• Für IHC-P und IF/ICC kann eine Optimierung der Fixierung und Permeabilisierung erforderlich sein, um sowohl nukleäre/zytoplasmatische als auch sezernierte Proteinpools nachzuweisen.
• ELISA-Anwendungen können so konzipiert werden, dass die lösliche Form von NAMPT in Serum oder Kulturüberständen erfasst wird. Fügen Sie geeignete Standards und Kontrollen ein.
• Bei der Verwendung kreuzreaktiver Spezies sollten Sie die Sequenzhomologie in der Immunogenregion überprüfen, um eine spezifische Erkennung sicherzustellen.

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