Anti-PARP1-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P09874

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PARP1-Funktion und Lokalisierung

• PARP1 ist ein hochkonserviertes nukleäres Enzym, das die Übertragung von ADP-Ribose von NAD+ auf Zielproteine katalysiert und eine zentrale Rolle bei der Reparatur von DNA-Einzelstrangbrüchen über den Basenexzisionsreparaturweg (BER) spielt. Verwandte Referenzen: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Es ist auch an der Reparatur von Doppelstrangbrüchen durch homologe Rekombination beteiligt und fördert die Rekrutierung von Reparaturfaktoren an Schadensstellen. Verwandte Referenzen: PMID:26344098, PMID:30356214
• Als Reaktion auf DNA-Schäden vermittelt PARP1 die Serin-ADP-Ribosylierung von Histonen, was die Chromatinentspannung und den Zugang für Reparaturfaktoren erleichtert; diese Aktivität ist von seinem Cofaktor HPF1 abhängig. Verwandte Referenzen: PMID:28190768, PMID:29954836, PMID:32028527
• Über die DNA-Reparatur hinaus fungiert PARP1 als Transkriptionsregulator, der die Transkription durch Modulation der Chromatinstruktur oder von Elongationsfaktoren reprimiert oder aktiviert. Verwandte Referenzen: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882
• PARP1 ist ein zentraler Mediator von Parthanatos, einem Caspase-unabhängigen Zelltodweg; während der Apoptose erzeugt die Caspase-3/7-Spaltung ein Fragment, das ins Zytoplasma transloziert und den AIFM1-vermittelten Zelltod auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:33168626
• Das Protein lokalisiert überwiegend im Zellkern und an Chromosomen, mit zusätzlicher Präsenz im Nukleolus; es kann unter bestimmten Bedingungen auch ins Zytoplasma shutteln.
• PARP1 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen, insbesondere der Auto-Poly-ADP-Ribosylierung, die seine Aktivität reguliert; es enthält auch mehrere Zinkfinger-Motive, die für die DNA-Bindung entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 81-390) liegt in der DNA-Bindedomäne; überprüfen Sie, ob der Antikörper sowohl das Voll- als auch das gespaltene PARP1 erkennt, wenn Sie Apoptose untersuchen.
• Für Western Blot: PARP1 hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~113 kDa; verwenden Sie geeignete Transferbedingungen für große Proteine.
• Bei IF/ICC: Sorgen Sie für eine ordnungsgemäße Fixierung und Permeabilisierung, um nukleäres PARP1 nachzuweisen; färben Sie mit einem DNA-Schadensmarker zur Lokalisationsbestätigung co.
• Für ELISA: Titrieren Sie den Antikörper und verwenden Sie geeignete Blockierungsmittel, um den Hintergrund zu minimieren.
• Die Charge-zu-Charge-Konsistenz sollte validiert werden, da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt.

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