Anti-pan 14-3-3 Kaninchen-Monoklonalantikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P27348 / P31946 / P61981 / P62258 / P63104 / Q04917 / P31947

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von pan 14-3-3

• Die menschliche 14-3-3-Proteinfamilie besteht aus sieben Isoformen – Beta, Gamma, Epsilon, Eta, Sigma, Theta und Zeta –, die von den Genen YWHAB, YWHAG, YWHAE, YWHAH, SFN, YWHAQ bzw. YWHAZ kodiert werden und von diesem pan-spezifischen Antikörper erkannt werden.
• Diese Adapterproteine binden an Phosphoserin/Phosphothreonin-Motive auf einer Vielzahl von Signalmolekülen und modulieren so Kinaseaktivitäten (z. B. negative Regulation von PDPK1), Apoptose und Stoffwechselwege.
• Die Theta-Isoform (P27348), auch bekannt als 14-3-3-Protein Tau oder HS1, ist reichlich im Gehirn, Herzen und in der Bauchspeicheldrüse exprimiert, in geringerem Maße in Niere und Plazenta; ihre Expression ist im Rückenmark bei Amyotropher Lateralsklerose (ALS) hochreguliert.
• 14-3-3-Proteine lokalisieren sich vorwiegend im Zytoplasma, was ihrer Rolle bei der Signalübertragung von der Zellmembran zu intrazellulären Effektoren entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Bildung von Isopeptidbindungen), sind entscheidend für die Regulation der 14-3-3-Dimerisierung, Stabilität und Interaktion mit Partnern.
• Schlüsselwörter aus kuratierten Datenbanken: 3D-Struktur, Acetylierung, Zytoplasma, Direkte Proteinsequenzierung, Isopeptidbindung, Nitrierung, Phosphoprotein, Proteomik-Identifizierung, Referenzproteom, Ubl-Konjugation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der hochkonservierten N-terminalen Region von 14-3-3 Theta (NP_006817.1, Aminosäuren 1-100), was eine breite Erkennung aller sieben menschlichen Isoformen gewährleistet; eine kreuzspezifische Reaktivität bei Maus und Ratte wurde bestätigt.
• Für Western Blots sind aufgrund der Isoformvielfalt mehrere Bänder zwischen 27 und 29 kDa zu erwarten; fügen Sie geeignete positive Kontrollen (z. B. HeLa-, HEK293- oder Gewebelysate des Gehirns) hinzu und validieren Sie die Bandmuster mit bekannten Expressionsprofilen.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) ist eine Permeabilisierung erforderlich, da das Ziel im Zytoplasma liegt; erwarten Sie eine diffuse Färbung, die als Reaktion auf spezifische Reize intensiver werden oder ihre Lokalisation ändern kann.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz dienen, aber die optimale Beschichtungskonzentration und die Assaybedingungen sollten empirisch ermittelt werden.

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