Anti-PAK3 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O75914

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PAK3-Funktion und -Lokalisierung

• PAK3 (Serin/Threonin-Proteinkinase PAK 3) ist ein Mitglied der p21-aktivierte Kinase (PAK)-Familie und wird vorwiegend in postmitotischen Neuronen des Großhirnrindes und des Hippocampus exprimiert (UniProt O75914, TISSUE SPECIFICITY).
• Es fungiert als downstream-Effektor der kleinen GTPasen CDC42 und RAC1 und spielt eine Schlüsselrolle bei der Regulation des Zytoskeletts, der Zellmigration und der Zellzyklusregulation (FUNCTION).
• PAK3 ist entscheidend für die Morphogenese von Dendritenstacheln, die Synapsenbildung und die synaptische Plastizität; in Hippocampus-Neuronen ist es für die Bildung von Dendritenstacheln und exzitatorischen Synapsen notwendig (FUNCTION, TISSUE SPECIFICITY).
• Nach Aktivierung durch CDC42/RAC1 unterliegt PAK3 einer Konformationsänderung und Autophosphorylierung an Serin/Threonin-Resten, phosphoryliert dann Ziele wie MAPK4, MAPK6, MAPKAPK5 und TNNI3/Troponin I, um die Aktinpolymerisation und Kalziumempfindlichkeit zu regulieren (FUNCTION).
• Zusätzliche Substrate umfassen die regulatorische leichte Kette von Myosin II (MLC), wodurch die PAK3-Kinaseaktivität mit der Aktomyosin-Kontraktilität in Dendritenstacheln verknüpft wird (FUNCTION, By similarity).
• Das Protein lokalisiert sich im Zytoplasma (SUBCELLULAR LOCATION) und enthält eine SH3-Bindungsdomäne und eine ubiquitinähnliche Domäne (KEYWORDS: SH3-binding, Ubl conjugation).
• PAK3 ist mit X-chromosomaler geistiger Behinderung (MRX30, MRX47, XLID30) assoziiert, und Variantenformen sind mit Krankheiten verknüpft (KEYWORDS: Disease variant, Intellectual disability).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid aus dem N-terminalen Bereich (aa 1-100) von humanem PAK3 (Isoform NP_001121638.1) hergestellt. Dieser Bereich kann in mehreren Isoformen vorhanden sein; die Spezifität sollte unter Verwendung von isoformspezifischen Kontrollen überprüft werden.
• Für den Western Blot beträgt das erwartete Molekulargewicht von vollständigem PAK3 ca. 62 kDa; Bereiten Sie Lysate aus relevanten neuronalen Zelllinien oder Hirngeweben vor und fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Sie verschiedene Fixierungs-/Permeabilisierungsprotokolle und Antikörperverdünnungen testen, um den Nachweis von endogenem PAK3, das im Zytoplasma lokalisiert ist, zu optimieren.
• ELISA-Anwendungen können verwendet werden, um den Titer des Antikörpers mit dem Immunisierungspeptid oder rekombinanten Protein zu bestimmen; eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Rattenproteinen wurde berichtet, aber eine Validierung im spezifischen Assay-System wird empfohlen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz variieren; eine vorläufige Testung mit Ihrem Versuchsaufbau wird empfohlen.

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