Anti-PAF1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q8N7H5

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: PAF1-Funktion und Lokalisierung

• Kernkomponente des PAF1-Komplexes (PAF1C), der die Transkriptionselongation durch RNA-Polymerase II, Histonomodifikationen und die Bildung des 3'-Endes der mRNA reguliert.
• PAF1C assoziiert mit dem CTD der RNA-Polymerase II sowohl im nicht-phosphorylierten als auch im phosphorylierten Zustand und erleichtert die Kopplung zwischen Transkription und kotranskriptionellen Prozessen.
• Fördert die Mono-Ubiquitinierung von Histon H2B K120 (H2BK120ub1) durch Rekrutierung des Ubiquitin-Ligase-Komplexes RNF20/40 und stimuliert die Methylierung von H3K4me3; diese Modifikationen sind entscheidend für die aktive Transkription.
• Erforderlich für die Transkription von Hox- und Wnt-Zielgenen und spielt eine Rolle bei der Hämatopoese und der Leukämogenese durch Wechselwirkungen mit KMT2A/MLL1-Fusions-Onkoproteinen.
• Lokalisiert im Zellkern, im Einklang mit seinen transkriptionsregulierenden Funktionen.
• Zeigt onkogene Aktivität; ist an alternativem Spleißen, Phosphorylierung und Ubiquitinierungswegen beteiligt.
• Während einer Influenza-A-(H3N2)-Infektion interagiert es mit dem viralen NS1-Protein, um die Transkription von Wirtsgenen zu modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der N-terminalen Region (aa 1-100) von humanem PAF1, daher kann der Antikörper die Volllänge und bestimmte Isoformen nachweisen. Überprüfen Sie die Isoformspezifität in Ihrem experimentellen System.
• Für Western Blot ist eine Bande in der Nähe von 60 kDa unter reduzierenden Bedingungen zu erwarten; fügen Sie positive Kontrollen wie Zelllysate von HeLa oder HEK293 hinzu.
• Die IHC-P-Färbung sollte eine nukleäre Lokalisierung zeigen; optimieren Sie die Antigen-Retrieval und die Antikörperverdünnung unter Verwendung geeigneter positiver Gewebekontrollen.
• In ELISA kann das Peptid-Immunogen als Standard dienen. Die Kreuzreaktivität mit murinem und rattigem PAF1 ermöglicht die Anwendung über diese Spezies hinweg; bestätigen Sie die Leistung in Proben der relevanten Spezies.
• Erwägen Sie Co-Immunopräzipitation oder ChIP-Assays, wenn der Antikörper in der Analyse nativer Proteinkomplexe funktioniert, validieren Sie diese Anwendungen jedoch unabhängig.

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