Anti-p70 S6 Kinase 1 Monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P23443

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: p70 S6 Kinase 1 Funktion und Lokalisierung

• Ribosomale Protein S6 Kinase beta-1 (RPS6KB1), auch bekannt als p70 S6 Kinase 1 (p70S6K1), S6K und STK14A, ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die vom RPS6KB1-Gen beim Menschen (GeneID: 6198) kodiert wird.
• Funktioniert als kritischer Downstream-Effektor der mTOR-Signalübertragung und fördert die Zellproliferation, das Zellwachstum und den Zellzyklus in Reaktion auf Wachstumsfaktoren und Nährstoffe. Verwandte Referenzen: PMID:11500364 PMID:12801526 PMID:14673156
• Reguliert die Proteinsynthese durch Phosphorylierung von EIF4B, RPS6 und EEF2K; verbessert auch die Translationale Initiation, indem es PDCD4 dem Abbau zuführt und POLDIP3/SKAR phosphoryliert. Verwandte Referenzen: PMID:11500364 PMID:12801526 PMID:14673156 PMID:17053147 PMID:15341740
• Lokalisiert hauptsächlich im Zytoplasma und Zellkern, wird aber unter bestimmten Bedingungen auch an der mitochondrialen Außenmembran, der Synapse und dem Synaptosom nachgewiesen.
• Weit verbreitet in verschiedenen Geweben exprimiert.
• An mehreren Stellen phosphoryliert und acetyliert; beteiligt an der Rückkopplungshemmung von mTORC2 durch Phosphorylierung von SIN1, mTOR, RICTOR und DEPTOR; unterdrückt auch das pro-apoptotische BAD und reguliert die Insulin-Signalübertragung über die IRS1-Phosphorylierung. Verwandte Referenzen: PMID:15899889 PMID:19720745 PMID:19935711 PMID:22017876 PMID:17936702 PMID:18952604

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1-100 der menschlichen p70 S6 Kinase 1 (NP_003152.1) entspricht. Diese N-terminale Zielung kann für den Nachweis von sowohl vollständigen als auch potenziell N-terminal verkürzten Isoformen nützlich sein.
• Für Western Blot (WB) wird eine Bande bei etwa 59 kDa in menschlichen, murinen und Rattenproben erwartet; Zelllinien oder Gewebe mit aktiver mTOR-Signalübertragung (z. B. stimulierte HeLa-, HEK293- oder Leber-Gewebe) können als Positivkontrollen dienen.
• In der Immunfluoreszenz (IF/ICC) können punktförmige zytoplasmatische und nukleäre Färbungen beobachtet werden, mit möglicher mitochondrialer oder synaptischer Lokalisation unter bestimmten Bedingungen; Fixierung und Permeabilisierung sollten optimiert werden.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz in Sandwich-Assays betrachtet werden, aber die Paarungsvalidierung und Titerbestimmung in der relevanten Probenmatrix werden empfohlen.
• Die Antikörperspezifität sollte anhand von Knockout/Knockdown-Modellen oder Phosphatasebehandlung zur Überprüfung der Phospho-Abhängigkeit bestätigt werden, da das Ziel stark phosphoryliert ist.

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