Anti-P4HB Rabbit PolymAb® für WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P07237

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: P4HB (Protein-Disulfid-Isomerase) Funktion und Lokalisierung

• P4HB kodiert für Protein-Disulfid-Isomerase (PDI), auch bekannt als PDIA1, ERBA2L und andere Aliasnamen. Es ist ein multifunktionales Enzym aus der Familie der Protein-Disulfid-Isomerasen.
• PDI katalysiert die Bildung, Spaltung und Umlagerung von Disulfidbindungen. An der Zelloberfläche wirkt es als Reduktase, die Disulfidbindungen angelagerter Proteine spaltet und möglicherweise exofaziale Proteine modifiziert. Intrazellulär sorgt es für die korrekte Disulfidbindungsbildung in neu synthetisierten Proteinen.
• In hohen Konzentrationen und nach Phosphorylierung durch FAM20C wirkt PDI als Chaperon, das die Aggregation fehlgefalteter Proteine hemmt. Umgekehrt fördert es in niedrigen Konzentrationen die Aggregation (Anti-Chaperon-Aktivität). Verwandte Referenzen: PMID:32149426
• PDI dient als strukturelle Untereinheit der Prolyl-4-Hydroxylase und des mikrosomalen Triacylglycerol-Transferproteins MTTP, was zur Kollagensynthese und zum Lipidstoffwechsel beiträgt.
• Es fungiert als Rezeptor für LGALS9 auf Th2-T-Helferzellen. Diese Interaktion hält P4HB an der Zelloberfläche, verstärkt die Disulfidreduktase-Aktivität, verändert den Redox-Status der Plasmamembran und fördert die Zellmigration. Verwandte Referenzen: PMID:21670307
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst das Lumen des endoplasmatischen Retikulums, Melanosomen und die Zellmembran, was seine vielfältigen Rollen in der Proteinfaltung, -sekretion und der Redox-Regulation an der Zelloberfläche widerspiegelt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung; es enthält ein redoxaktives Zentrum mit Disulfidbindungen und weist strukturelle Merkmale wie Thioredoxin-ähnliche Domänen auf.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 329–508 (C-terminale Region) von humanem P4HB, was Spezifität gegenüber PDI verleihen und Kreuzreaktivität mit anderen Mitgliedern der Disulfid-Isomerase-Familie verringern kann.
• Für Western Blot (WB) ist ein Band bei etwa 57 kDa zu erwarten. Validieren Sie den Antikörper in Ihrem spezifischen Probensystem, da posttranslationale Modifikationen zu geringfügigen Verschiebungen führen können.
• Bei Immunpräzipitation (IP) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) kann die native Proteinkonformation erkannt werden; optimieren Sie Lyse- und Fixierungsbedingungen, um Epitope zu erhalten.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) sollten geeignete Antigen-Retrieval-Methoden in Betracht gezogen werden, da sich das Epitop in einer strukturierten Domäne befindet.
• Es wird berichtet, dass der Antikörper mit Maus- und Ratten-P4HB kreuzreagiert, eine Validierung in der gewünschten Spezies/ im gewünschten Gewebe wird jedoch empfohlen.

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