Anti-P4HA3-Kaninchen-polykolonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q7Z4N8

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von P4HA3

• P4HA3 (Prolyl-4-Hydroxylase-Untereinheit Alpha-3) ist ein für die Kollagenbiosynthese essenzielles Enzym, das die Bildung von 4-Hydroxyprolin in -Xaa-Pro-Gly-Motiven katalysiert.
• Diese posttranslationale Modifikation ist für die thermische Stabilität der Kollagen-Tripelhelix und den korrekten Aufbau der extrazellulären Matrix unerlässlich.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen. Das Protein weist ein Signalpeptid, Tetratricopeptid-(TPR-)Wiederholungen und eine Coiled-Coil-Domäne auf.
• Es befindet sich hauptsächlich im Lumen des endoplasmatischen Retikulums, wo die Kollagenverarbeitung stattfindet.
• Es wird stark in der Plazenta, der Leber und der fetalen Haut exprimiert; außerdem wurde es in fibrösen Kappen atherosklerotischer Läsionen und in geringeren Mengen in anderen Geweben nachgewiesen.
• Es gehört zur P4HA-Familie der 2-Oxoglutarat- und eisenabhängigen Dioxygenasen und benötigt Vitamin C für seine Aktivität.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehört die Glykosylierung. Außerdem ist bekannt, dass das Protein Eisen als Kofaktor bindet.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen (AS 20–110) zielt auf die N-terminale Region ab. Führen Sie einen Sequenzvergleich durch, um die Kreuzreaktivität mit weiteren Spezies vorherzusagen.
• Beim Western-Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 61 kDa. Validieren Sie den Antikörper mit Lysaten aus Plazenta oder Leber als Positivkontrollen.
• Für IF/ICC sollten die Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, um das im ER-Lumen lokalisierte Protein nachzuweisen.
• Für den ELISA kann eine Titration sowohl des Beschichtungsantigens als auch des Antikörpers erforderlich sein, um ein optimales Signal zu erzielen.

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