Anti-P4HA2 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – O15460

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von P4HA2

• Prolyl-4-Hydroxylase-Untereinheit Alpha-2 (P4HA2) ist ein Schlüsselenzym bei der Kollagenbiosynthese. Es katalysiert die Hydroxylierung von Prolinresten in -Xaa-Pro-Gly- Sequenzen zur Bildung von 4-Hydroxyprolin, das für die Stabilität und Funktion der Kollagen-Triplehelix essenziell ist.
• P4HA2 ist eine von mehreren Alpha-Untereinheits-Isoformen, die mit P4HB (Beta-Untereinheit) heterotetramere Komplexe bilden, um aktive Prolyl-4-Hydroxylase zu konstituieren; alternatives Spleißen ergibt mehrere Transkriptvarianten.
• Das Enzym lokalisiert überwiegend im Lumen des Endoplasmatischen Retikulums, wo die posttranslationale Modifikation neu synthetisierter Kollagenpolypeptide stattfindet.
• Seine katalytische Aktivität hängt von den Cofaktoren Eisen (Fe²⁺), 2-Oxoglutarat, molekularem Sauerstoff und Ascorbat (Vitamin C) ab, wodurch es zur Familie der 2-Oxoglutarat-abhängigen Dioxygenasen gehört.
• Gewebeexpressionsanalysen zeigen die höchsten Gehalte im Herz, der Plazenta, der Lunge und dem Pankreas, was mit Geweben übereinstimmt, die reich an Kollagen Typ I und IV sind.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen N-verknüpfte Glykosylierung; das Protein ist außerdem mit Eisen- und Metallbindungsdomänen annotiert, und seine Defekte sind mit Krankheitsvarianten assoziiert.
• Das Protein enthält Tetratricopeptid-Wiederholungs (TPR)-Motive, die an Protein-Protein-Interaktionen und die Assemblierung des Prolyl-4-Hydroxylase-Komplexes beteiligt sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Resten 239–333 von menschlichem P4HA2, einer Region, die bei Säugetieren hohe Sequenzkonservierung aufweist; empfehlt sich die Überprüfung der Alignment für Ihr Modellorganismus.
• Für Western Blot (WB) sollte eine erwartete Bande um 61 kDa beobachtet werden; verwenden Sie reduzierende Bedingungen, sofern nicht anders optimiert.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC ist eine ER-lokalisierte Färbung zu erwarten; eine Co-Färbung mit einem ER-Marker wird empfohlen.
• Für ELISA standardisieren Sie Beschichtungsantigen und Antikörperverdünnung in Ihrem Assaysystem; die Kreuzreaktivität spricht für die Eignung für Proben von Mensch, Maus und Ratte.
• Da die Kollagenhydroxylierung ein dynamischer Prozess ist, sollten Sie P4HA2-Detektion in Studien zu Fibrose, Krebsstroma-Umbau oder Bindegewebserkrankungen in Betracht ziehen.

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