Anti-P4HA2 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - O15460

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: P4HA2-Funktion und -Lokalisierung

• P4HA2 (Prolin-4-Hydroxylase-Untereinheit Alpha-2) ist eine wichtige katalytische Untereinheit des Prolin-4-Hydroxylase-Enzymkomplexes, der die posttranslationale Bildung von 4-Hydroxyprolin in Kollagenen und anderen Proteinen mit -Xaa-Pro-Gly- Sequenzen katalysiert.
• Diese Hydroxylierung ist entscheidend für die Stabilität der Kollagen-Tripelhelix und die ordnungsgemäße Zusammenstellung der extrazellulären Matrix.
• Das Enzym lokalisiert sich im Lumen des endoplasmatischen Retikulums, wo die Kollagenverarbeitung und -modifikation stattfinden.
• P4HA2 wird in mehreren Geweben exprimiert, einschließlich Herz, Plazenta, Lunge und Bauchspeicheldrüse, was auf Rollen bei organspezifischer Matrixremodellierung hindeutet.
• Das Protein benötigt Eisen und Vitamin C als Kofaktoren für seine Dioxygenase-Aktivität und unterliegt einer Glykosylierung.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, die möglicherweise unterschiedliche biologische Funktionen haben.
• Mutationen oder Fehlregulationen von P4HA2 sind mit Fibrose und anderen Bindegewebserkrankungen verbunden; es ist als Krankheitsvariante in UniProt aufgeführt.
• Schlüsselwörter: Glykoprotein, Eisen, Metallbindung, Oxidoreduktase, TPR-Wiederholung, Vitamin C, Alternatives Spleißen, Krankheitsvariante.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen (Aminosäuren 157-333) kann mehrere P4HA2-Isoformen erkennen; überprüfen Sie die Reaktivität mit der spezifischen Isoform von Interesse.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von P4HA2 ca. 61 kDa. Posttranslationale Modifikationen können jedoch zu leichten Verschiebungen führen; validieren Sie mit geeigneten Kontrollen und einem positiven Lysat aus einem Gewebe, das P4HA2 exprimiert (z. B. Plazenta oder Herz).
• Dieser Antikörper ist für ELISA validiert; bei der Entwicklung von Sandwich-Immunoassays kann die Kombination mit einem anderen Anti-P4HA2-Antikörper die Empfindlichkeit und Spezifität verbessern. Titrieren Sie sowohl Erfassungs- als auch Nachweisantikörper in der relevanten Matrix.
• Eine Kreuzreaktivität wurde für humanes P4HA2 bestätigt; andere Spezies wurden nicht getestet. Wenn Sie nicht-menschliche Proben untersuchen, bewerten Sie die Sequenzhomologie im Immunogenbereich.
• Für Immunhistochemie oder andere nicht aufgeführte Anwendungen testen Sie den Antikörper zunächst unter geeigneten Bedingungen, da die Leistung je nach Fixierung und Antigen-Retrieval-Methoden variieren kann.

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