Anti-P4HA1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P13674

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: P4HA1-Funktion und -Lokalisierung

• Prolyl-4-Hydroxylase-Untereinheit Alpha-1 (P4HA1), auch bekannt als Prokollagen-Prolin-2-Oxoglutarat-4-Dioxygenase-Untereinheit Alpha-1, ist eine katalytische Untereinheit des Kollagen-Prolyl-4-Hydroxylase-Enzymkomplexes.
• Sie katalysiert die posttranslationale Bildung von 4-Hydroxyprolin in -Xaa-Pro-Gly- Sequenzen in Kollagenen und anderen Proteinen, was für die Stabilität der Kollagen-Tripelhelix wesentlich ist.
• P4HA1 lokalisiert im Lumen des endoplasmatischen Retikulums, wo es während der Biosynthese neu entstehende Prokollagenketten modifiziert.
• Das Protein wird in mehreren Geweben exprimiert, einschließlich Herz, Leber, Skelettmuskel, Niere, Plazenta, Lunge und Bauchspeicheldrüse.
• Als Dioxygenase benötigt P4HA1 Eisen und Vitamin C als Kofaktoren und ist ein Mitglied der Familie der 2-Oxoglutarat-abhängigen Oxygenasen.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehört die Glykosylierung, und das Gen unterliegt alternativem Spleißen, was potenziell mehrere Isoformen erzeugen kann.
• Schlüsselwörter: 3D-Struktur, Alternatives Spleißen, Dioxygenase, Endoplasmatisches Retikulum, Glykoprotein, Eisen, Metallbindung, Oxidoreduktase, Proteomics-Identifizierung, Referenzproteom, Signal, TPR-Wiederholung, Vitamin C.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 235-534 von menschlichem P4HA1 umfasst. Die Antikörperspezifität kann durch Peptid-Wettbewerbs-ELISA oder Western Blot unter Verwendung von rekombinantem P4HA1-Protein bestätigt werden.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~61 kDa; validieren Sie mit positiven Kontrolllysaten aus menschlichen, murinen oder rattigen Zelllinien, die P4HA1 exprimieren.
• In der Immunfluoreszenz/ICC wird erwartet, dass sich P4HA1 im endoplasmatischen Retikulum lokalisiert; verwenden Sie eine geeignete Co-Färbung (z. B. ER-Marker), um dies zu bestätigen.
• Für ELISA sollten Sie ein direktes oder Sandwich-Format in Betracht ziehen und den Antikörper titrieren, um ein optimales Signal mit dem immunisierenden Peptid oder dem全长-Protein zu erzielen.
• Die Antikörperleistung kann je nach Anwendung variieren; Pilotstudien mit bekannten positiven/negativen Kontrollen werden empfohlen.

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