Anti-p47phox/NCF1 Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P14598

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von p47phox/NCF1

• Auch bekannt als Neutrophilen-Zytosolfaktor 1, NCF-47K, Nox-Organisator 2 (NOXO2) und p47-phox. Es ist eine Untereinheit des Phagozyten-NADPH-Oxidase-Komplexes.
• Als Teil des NADPH-Oxidase-Komplexes vermittelt es den Elektronentransfer von NADPH zu O2 zur Bildung von Superoxidanionen (PubMed:2547247, PubMed:2550933, PubMed:38355798). Diese Superoxidbildung ist entscheidend für die mikrobizide Aktivität von Phagozyten. Verwandte Referenzen: PMID:2547247, PMID:2550933, PMID:38355798
• Die Aktivierung der Oxidase beinhaltet die phosphorylierungsabhängige Bindung von NCF1 an den C-Terminus von CYBA/p22-phox, was die Translokation zytosolischer Untereinheiten zur Membran fördert (PubMed:12732142, PubMed:19801500). Verwandte Referenzen: PMID:12732142, PMID:19801500
• Das Protein enthält SH3- und PX-Domänen, die an Protein-Protein- und Lipidinteraktionen beteiligt sind und die Assemblierung des Komplexes erleichtern.
• Subzelluläre Lokalisation umfasst Zytoplasma, Zytosol und Membran; es ist hauptsächlich zytosolisch und transloziert nach Aktivierung zur Membran.
• Gewebespezifität: Auf Proteinebene in Monozyten und Neutrophilen des peripheren Blutes nachgewiesen.
• Schlüsselwörter heben die Assoziation mit chronischer granulomatöser Krankheit (CGD), alternatives Spleißen, Phosphoprotein und SH3-Domäne hervor.
• Es spielt eine Rolle bei der Wirtsabwehr; Mutationen sind mit CGD verbunden, einer Immundefizienz, die durch wiederkehrende Infektionen gekennzeichnet ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1-390 und deckt die gesamte Proteinsequenz ab. Dies kann die Erkennung mehrerer Isoformen ermöglichen, falls diese vorhanden sind.
• Für Western Blot beträgt das erwartete Molekulargewicht etwa 45 kDa; überprüfen Sie dies in relevanten Lysaten von humanen, Maus- oder Ratten-Monozyten/Neutrophilen.
• Für die Immunfluoreszenz kann eine Permeabilisierung erforderlich sein, um zytosolisches p47phox nachzuweisen; validieren Sie das Signal in aktivierten gegenüber ruhenden Phagozyten.
• Bei der Immunpräzipitation kann der Antikörper andere Komponenten des NADPH-Oxidase-Komplexes mitpräzipitieren; bestätigen Sie dies mit geeigneten Kontrollen.
• Für ELISA testen Sie den Antikörper als Capture- oder Nachweisreagenz in einem Sandwich-Assay; optimieren Sie die Konzentrationen und validieren Sie mit bekannten Standards.

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