Anti-p38 MAPK Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q16539

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: p38 MAPK (MAPK14) Funktion und Lokalisierung

• MAPK14 ist eine Serin/Threonin-Kinase, die als Kernkomponente des p38 MAP-Kinase-Signalwegs dient. Durch pro-inflammatorische Zytokine und verschiedene Stressoren aktiviert, reguliert sie ein umfangreiches Netzwerk von Downstream-Substraten (geschätzt 200–300 Ziele), um diverse zelluläre Prozesse zu steuern, einschließlich Genexpression, mRNA-Stabilität, Translation und Proteinumsatz.
• Durch Phosphorylierung der Downstream-Kinasen MSK1/2 und MAPKAPK2/3/MNK1/2 orchestriert MAPK14 die transkriptionelle und post‑transkriptionelle Regulation. MSK1/2 aktivieren Transkriptionsfaktoren (CREB1, ATF1, NF‑κB, STAT1/3) und phosphorylieren direkt Histon H3 und HMGN1, um Chromatin-Remodellierung und die Induktion von Immediate‑Early-Genen zu fördern. MAPKAPK2/3 kontrollieren die mRNA-Stabilität über ZFP36 und ELAVL1, während MNK1/2 die Translation durch eIF4E2-Phosphorylierung modulieren. Verwandte Referenzen: PMID:9687510, PMID:9792677, PMID:11154262
• MAPK14 phosphoryliert direkt eine Reihe von Transkriptionsfaktoren, darunter TP53/p53 (in Kooperation mit Kaseinkinase II), ATF1, ATF2, ELK1 und MEF2C/MEF2A, und verbindet so Stresssignale mit transkriptioneller Reprogrammierung. Verwandte Referenzen: PMID:10747897, PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• Die Kinase reguliert den Proteinabbau und die Membranrezeptordynamik. Sie phosphoryliert CFLAR, um den proteasomalen Abbau zu fördern, kontrolliert die Aktivität der SIAH2-Ubiquitin-Ligase und beeinflusst den ATG9-Transport, um die Autophagie zu modulieren. Darüber hinaus phosphoryliert MAPK14 EGFR und RAB5A-Effektoren, um die Clathrin‑vermittelte Endozytose zu regulieren, und aktiviert die ADAM17‑gesteuerte Ektodomänen-Abspaltung von EGFR-Liganden. Verwandte Referenzen: PMID:17003045, PMID:19893488, PMID:16932740, PMID:20188673
• MAPK14 ist an Zellzyklus-Kontrollpunkten und DNA-Schadensantworten beteiligt. Sie phosphoryliert CDC25B und CDC25C, ermöglicht die Bindung von 14‑3‑3 und initiiert eine G2-Verzögerung nach UV-Bestrahlung. Bei DNA-Schäden phosphoryliert sie TIAR, wodurch TIAR von der GADD45A-mRNA freigesetzt und der Abbau des Transkripts verhindert wird. Verwandte Referenzen: PMID:11333986, PMID:20932473
• Essentiell für das Wachstum der Plazenta-Labyrinth-Blutgefäße und die stressinduzierte Erythropoese durch Regulation der EPO-Genexpression. MAPK14 löst auch die NLRP1-Inflammasom-Aktivierung stromabwärts von Ribosomenkollisionen aus, was zu Pyroptose führt. Zusätzlich phosphoryliert während einer M. tuberculosis-Infektion das bakterielle EsxA MAPK14, um die IFN‑γ-Produktion in T-Zellen zu unterdrücken. Verwandte Referenzen: PMID:10943842, PMID:35857590, PMID:21586573
• MAPK14 wird in einer Vielzahl von Geweben exprimiert, mit den höchsten Spiegeln im Gehirn, Herz, Plazenta, Pankreas und Skelettmuskel; eine geringere Expression wird in Lunge, Leber und Niere beobachtet. Sie lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern. Alternatives Spleißen erzeugt Isoformen wie MXI2 (reduzierte Kinaseaktivität) und EXIP (pro‑apoptotisch). Das Protein unterliegt mehreren post‑translationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitin‑ähnlicher Konjugation.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 100‑200 entspricht) liegt in einer konservierten Region; daher ist eine Kreuzreaktivität mit murinem und ratten MAPK14 zu erwarten. Validieren Sie die Reaktivität in relevanten spezies-spezifischen Zell- oder Gewebelysaten vor dem routinemäßigen Einsatz.
• Für Western Blot sollten Sie Ganzzellextrakte aus gestressten vs. ruhenden Zellen verwenden, um phospho-spezifische Bandenverschiebungen zu beobachten. Schließen Sie immer geeignete Kontrollen ein (z.B. Phospho-p38-Antikörper, Kinaseinhibitoren), um die Signalspezifität sicherzustellen.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC optimieren Sie die Fixierungs-/Permeabilisierungsbedingungen und bestätigen Sie Färbemuster, die mit der zytoplasmatischen und nukleären Verteilung übereinstimmen. Eine Co-Färbung mit Kompartiment-Markern wird empfohlen.
• Für ELISA verwenden Sie rekombinantes humanes MAPK14-Protein als Standard und validieren Sie die Linearität des Nachweises. Kombinieren Sie diesen Antikörper mit einem geeigneten Detektionsantikörper, um einen empfindlichen Sandwich-ELISA zu entwickeln.
• Da MAPK14 kinaseunabhängige Funktionen und mehrere Isoformen aufweist, verifizieren Sie, dass Ihr experimentelles Messergebnis die spezifische Rolle widerspiegelt, die Sie untersuchen möchten.

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