Anti-p38 MAPK polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q16539

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: p38 MAPK-Funktion und Lokalisierung

• Die Mitogen-aktivierte Proteinkinase 14 (MAPK14), allgemein bekannt als p38 alpha, ist eine stressaktivierte Serin/Threonin-Kinase aus der MAP-Kinase-Familie. Sie existiert als mehrere Isoformen, einschließlich EXIP und MXI2, die durch alternatives Spleißen entstehen.

• Nach Aktivierung durch extrazelluläre Signale wie pro-inflammatorische Zytokine oder physikalischen Stress phosphoryliert p38 nachgeschaltete Kinasen MSK1/2, die dann Transkriptionsfaktoren (CREB1, NF-κB, STATs) und Histon H3 regulieren (PubMed:9687510, PubMed:9792677). Es aktiviert auch MK2/3, um die mRNA-Stabilität über ZFP36 und ELAVL1 zu kontrollieren, und MNK1/2, um EIF4E2 für die Translationsinitiation zu phosphorylieren (PubMed:11154262). Verwandte Referenzen: PMID:9687510 PMID:9792677 PMID:11154262

• p38 reguliert den Proteinumsatz durch Phosphorylierung der Ubiquitin-Ligase SIAH2 (PubMed:17003045) und des Apoptose-Inhibitors CFLAR und kann Autophagie durch Beeinträchtigung des ATG9-Transports hemmen (PubMed:19893488). Verwandte Referenzen: PMID:17003045 PMID:19893488

• In der Rezeptordynamik treibt p38 die Clathrin-vermittelte EGFR-Internalisierung durch Phosphorylierung von EGFR selbst und RAB5A-Effektoren an (PubMed:16932740) und fördert die Ektodomänen-Abspaltung von TGF-α-Familienliganden durch Aktivierung der Metalloprotease ADAM17 (PubMed:20188673). Verwandte Referenzen: PMID:16932740 PMID:20188673

• Nukleäres p38 phosphoryliert direkt Transkriptionsfaktoren, einschließlich ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, TP53/p53 und MEF2A/C (PubMed:10330143, PubMed:9430721, PubMed:9858528), und verbessert die NF-κB-Zugänglichkeit an Promotoren von Entzündungsgenen durch Erhöhung der Histon-H3-Phosphorylierung an Ser-10. Verwandte Referenzen: PMID:10330143 PMID:9430721 PMID:9858528

• p38 trägt zur Zellzyklusregulation bei, indem es CDC25B/C phosphoryliert, was zu einer G2-Verzögerung nach ultravioletter Strahlung führt (PubMed:11333986). Es ist auch essentiell für die entwicklungsbedingte und stressinduzierte Erythropoese durch Regulation der EPO-Genexpression (PubMed:10943842). Verwandte Referenzen: PMID:11333986 PMID:10943842

• Während einer Infektion kann M. tuberculosis EsxA p38 in T-Zellen aktivieren, was zu einer Hemmung der IFN-γ-Produktion führt (PubMed:21586573). Verwandte Referenzen: PMID:21586573

• p38 lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern. Es ist weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Konzentrationen im Gehirn, Herz, Plazenta, Pankreas und Skelettmuskel und niedrigeren Konzentrationen in Lunge, Leber und Niere. Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Ubiquitylierung, und es wird in Proteomik-Studien identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 261–360 von humanem p38) ist zwischen Human, Maus und Ratte konserviert, was mit der Kreuzreaktivität des Antikörpers übereinstimmt. Vor Erweiterung auf andere Spezies durch Sequenzalignment überprüfen.
• Für Western Blotting denaturierende reduzierende Bedingungen verwenden und einen Startverdünnungsbereich des Antikörpers von 1:500–1:2000; mit geeigneten Positivkontrollen (z.B. HeLa, Jurkat) optimieren.
• Für IHC-P kann eine Antigen-Retrieval (z.B. Citratpuffer, pH 6.0) erforderlich sein; die Färbespezifität mit Blockierpeptid oder Knockout-Gewebekontrollen validieren.
• Für IF/ICC mit 4% PFA fixieren und mit 0,1% Triton X-100 permeabilisieren; mit Kern-/Zytoplasma-Markern ko-färben.
• Für IP 1–2 µg Antikörper pro 500 µg Proteinlysat verwenden und mit Protein A/G-Beads einfangen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; das Pairing mit einem passenden monoklonalen Antikörper testen.

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