Anti-P-Glykoprotein Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P08183

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des P-Glykoproteins

• P-Glykoprotein (ABCB1) ist eine ATP-abhängige Translokase, die eine breite Palette von Arzneimittelsubstraten und Phospholipiden aus der Zelle pumpt und eine Schlüsselrolle bei der Multidrug-Resistenz spielt. Verwandte Referenzen: PMID:2897240, PMID:35970996, PMID:9038218
• Es katalysiert die outward-Translokation (Flop) verschiedener Phospholipide, einschließlich Phosphatidylcholin und Sphingomyelin, vom zytoplasmatischen zum exoplasmatischen Blatt der apikalen Membran. Verwandte Referenzen: PMID:8898203
• Das Protein ist primär an der apikalen Zellmembran lokalisiert und auch im Zytoplasma nachweisbar, was mit einem Transporter übereinstimmt, der zwischen Kompartimenten zirkuliert.
• Es ist hoch exprimiert in Geweben mit Barrierenfunktion wie Dünndarm, Leber, Niere und Gehirn und beeinflusst die Arzneimittelabsorption und -verteilung.
• Strukturell enthält es zwei Nukleotid-bindende Domänen (NBDs) und zwölf transmembrane Helices mit funktionellen Motiven für ATP-Bindung und Phosphorylierung und unterliegt einer N-verknüpften Glykosylierung.
• Alternatives Spleißen erzeugt multiple Isoformen, und das Protein ist klinisch wichtig, da seine Dysfunktion mit Krankheitsvarianten verbunden ist, die die Arzneimittelpharmakokinetik beeinflussen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen einen Bereich entworfen, der die Aminosäuren 393–710 des humanen P-Glykoproteins umfasst, was einer intrazellulären Nukleotid-bindenden Domäne (NBD1) entspricht. Dieses Design kann die Erkennung des nativen Transporters über Spezies hinweg erleichtern.
• Für WB sollten reduzierende Bedingungen und eine adäquate Proteinbeladung in Betracht gezogen werden, da P-Glykoprotein ein Membranprotein mit hohem Molekulargewicht (141 kDa) ist.
• Für ELISA sollte der Antikörper gegen rekombinantes oder zelluläres Antigen validiert werden. Angesichts der berichteten Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist er möglicherweise für präklinische Studien geeignet.

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