Anti-OX40L Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P23510

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von OX40L (TNFSF4)

• OX40L, auch bekannt als TNFSF4, CD252 und Glykoprotein Gp34, gehört zur Superfamilie der Tumornekrosefaktor(TNF)-Liganden und fungiert als zentrales kostimulatorisches Molekül bei Immunantworten.
• Es codiert ein Typ-II-Transmembranprotein, das hauptsächlich auf aktivierten antigenpräsentierenden Zellen (APZ) exprimiert wird, darunter B-Zellen, dendritische Zellen und Makrophagen.
• OX40L bindet spezifisch an seinen Rezeptor TNFRSF4 (OX40) auf aktivierten T-Zellen und löst kostimulatorische Signale aus, die die Proliferation, das Überleben und die Produktion von Effektorzytokinen der T-Zelle verstärken.
• Das Protein ist über eine N-terminale Signal-Anker-Sequenz in der Zellmembran verankert, wobei die C-terminale TNF-Homologiedomäne zum extrazellulären Raum weist. Dies ermöglicht die Trimerisierung und die Bindung an den Rezeptor.
• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, sind entscheidend für die strukturelle Stabilität und Bioaktivität.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und genetische Polymorphismen im TNFSF4-Gen werden mit der Anfälligkeit für systemischen Lupus erythematodes (SLE) und andere Autoimmunerkrankungen in Verbindung gebracht.
• Die für die Immunisierung verwendete extrazelluläre Domäne (ungefähr Aminosäuren 51‑183) entspricht der rezeptorbindenden Region, wodurch sichergestellt wird, dass der Antikörper den funktionellen Teil des Moleküls targetiert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die vorhergesagte extrazelluläre Domäne (AS 51‑183) ab, sodass der Antikörper sowohl die membrangebundene Form als auch alle löslichen abgespaltenen Fragmente von OX40L erkennen sollte.
• Für das Western Blotting beträgt das theoretische Molekulargewicht ~21 kDa; dennoch kann die Glykosylierung zu einer Verschiebung der Wanderung führen. Reduzierende Bedingungen werden empfohlen; validieren Sie mit geeigneten Positivkontrollen.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC müssen Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle ggf. optimiert werden, da das Epitop extrazellulär vorliegt, aber durch Vernetzung beeinträchtigt werden kann. Testen Sie sowohl permeabilisierte als auch nicht permeabilisierte Bedingungen.
• Die nachgewiesene Kreuzreaktivität mit murinem OX40L erlaubt die Verwendung in Mausmodellen; überprüfen Sie die Leistung in Ihrem spezifischen experimentellen System.
• Für ELISA-Anwendungen erwägen Sie die Paarung dieses polyclonalen Antikörpers mit einem geeigneten Capture/Detection-Partner, um einen robusten Sandwich-Assay aufzubauen.

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